Questão 1423660

• Banca: FUNIVERSA
• Órgão: SEGPLAN-GO
• Ano: 2015
• Provas: FUNIVERSA - 2015 - SEGPLAN-GO - Perito Criminal; FUNIVERSA - 2015 - SPTC-GO - Perito criminal de 3ª Classe
• Disciplina: Biologia

      Os avanços nas tecnologias de DNA vêm causando um grande impacto no campo da ciência forense. A análise de DNA tem sido uma poderosa ferramenta para a identificação humana e para as investigações criminais, muito em função do desenvolvimento de testes com uma boa sensibilidade e um alto poder de discriminação. Entre eles, inclui-se a técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) capaz de realizar a detecção rápida de marcadores moleculares.

                                                                                                Revista Brasileira de Análises Clínicas (com adaptações).

Com relação à PCR e ao seu uso na identificação forense, assinale a alternativa correta.

• A. Apesar de a PCR ser uma técnica empregada para amplificação seletiva de uma sequência-alvo de DNA a partir de DNA previamente extraído, ela não permite a inserção de primers ao DNA-molde desnaturado.
• B. O processo que envolve a síntese de novas fitas de DNA, resultando em um fragmento de DNA com sequência idêntica à do DNA a ser analisado, ocorre mediante ação de DNA-ligase.
• C. Uma das desvantagens da PCR é a incapacidade de se obter resultados, especialmente nos casos em que o DNA-alvo esteja degradado ou embebido em um meio que dificulte o isolamento desse DNA.
• D. A grande vantagem da PCR sobre as demais técnicas utilizadas para genotipagem de marcadores genéticos é que os resultados de tipagem nunca são afetados, principalmente se os níveis de DNA contaminante estiverem comparáveis aos do DNA-alvo.
• E. A PCR possibilita a tipagem do DNA em amostras de prova que não poderiam ser analisadas por meio de outras técnicas, como, por exemplo, o Southern, uma vez que ela necessita de uma grande quantidade de DNA total.

Gabarito: E

Comentários

• Reacção em cadeia da polimerase (em inglês Polymerase Chain Reaction - PCR) é um MÉTODO DE AMPLIFICAÇÃO (de criação de múltiplas cópias) de DNA (ácido desoxirribonucleico) sem o uso de um organismo vivo, por exemplo, Escherichia coli (bactéria) ou leveduras.
  
  História: Inventada em 1983 por Kary Mullis, a PCR é uma das técnicas mais comuns utilizadas em laboratórios de pesquisas médicas e biológicas para diversas tarefas, como o sequenciamento de genes e diagnóstico de doenças hereditárias, identificação de "impressão digital" genética (usado em testes de paterninade e na medicina forense), detecção de diagnóstico de doenças infecciosas e criação de organismos transgênicos.
  
  Aplicações: A PCR encontra sua principal aplicação em situações onde a quantidade de DNA disponível é reduzida. Em teoria, é possível amplificar qualquer DNA. Uma das principais aplicações da PCR é na medicina forense, onde pequenas amostras de DNA retiradas da cena de um crime (pedaços de cabelo que contenham bulbo, gotas de sangue ou saliva, pedaços de pêlo ou até mesmo a minúscula quantidade de DNA deixada em uma impressão digital) são amplificadas para serem analisadas pelo método de fingerprinting.
  
  Procedimentos: A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é um método muito sensível de análise e por isso é realizado com muito cuidado para evitar contaminações que possam inviabilizar ou tornar errôneo o resultado. O processo consiste basicamente em utilizar os mecanismos da replicação in vitro. Os cientistas então simplificaram ao máximo o processo de polimerização das moléculas. A maquinaria para separar as fitas sense e anti-sense são muito complexas na célula, no lugar utiliza-se a mudança de temperatura. Os ciclos são pensados para disponibilizar o sitio alvo para a ligação dos primers, funcionamento da polimerase e iniciou de um novo ciclo.
  
  Variações da Técnica: Nested PCR (aumenta a quantidade de produto amplificado ou a sensibilidade técnica) e Hot Start (ativida quando a temperatura atinge 94oC).

• A banca colocou como gabarito preliminar a alternativa E).

  Justificativa da anulação

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  Questão 33 – Anular 

  O uso do pronome “ela” na alternativa “E” causa ambiguidade interpretativa, o que dificulta a análise e o julgamento da alternativa por parte dos candidatos.
  

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  O southern blot necessita de uma grande quantidade de DNA. Mas a redação causou ambiguidade e foi anulada.

• Exato, Guilherme. O ideal seria colocar "esta".