Questão 1722229

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Controle Microbiológico
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Aplicação e Execução de Técnicas Bacteriológicas; Microbiologia

Com relação à seleção de recombinantes de pUC8 em um meio contendo Ágar + X-gal + IPTG, é correto afirmar que:

• A. as colônias com a cor branca são aquelas incapazes de produzir a β-Galactosidase e, por isso, degradar o X-gal.
• B. as colônias de cor azul são aquelas capazes de degradar o IPTG.
• C. o X-gal age como um indutor da β-Galactosidase.
• D. as colônias de cor branca conseguem degradar o X-gal devido à indução da β-Galactosidase pelo IPTG.
• E. as colônias recombinantes são incapazes de produzir a β-Galactosidase na presença de ampicilina e IPTG .

Gabarito: A

Comentários

• Técnica utilizada para clonagem de fragmentos de DNA. Plasmídeos da série PUC possuem um gene(gene lacZ) que codificada a produção da enzima beta-galactosidase. A inserção do DNA estranho no sítio de clonagem do plasmídeo causa a interrupção do gene, levando à perda da função da beta-galactosidase. As colônias brancas possuem o inserto( DNA "esrranho") e a enzima(beta-galactosidase) encontra-se inativa, as colônias sem o inserto se apresentam azuis e com a enzima ativa. O IPTG- Indutor da galactodidase, usado para promover a expressão de proteínas em células controladas pelo sistema operon lac. X-GAL- Utilizado em conjunto com o IPTG para a detecção da enzima beta-galactosidase em colônias bacterianas. Colônias recombinante: BRANCAS. Colônias não recombinantes: AZUIS. Colônias