Questão 1729675

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Biologia Celular e Molecular Aplicada à Virologia
• Disciplina: Técnicas em Laboratório

O método de seqüenciamento Sanger:

• A. é baseado na modificação química do DNA utilizando piperidina e foi inicialmente desenvolvido por Alan Maxam e Walter Gilbert e mais tarde modificado por Sanger.
• B. é baseado na incorporação de didesoxinucleotídeos que, ao serem incorporados, impedem a adição de nucleotídeos adicionais.
• C. requer todas as enzimas necessárias para a replicação de DNA como Helicases, Polimerases, porém, não necessita da Primase pois são adicionados iniciadores artificiais com os nucleotídeos e didesoxinucleotídeos.
• D. depende do preparo de géis de acrilamida para separar os diferentes fragmentos de DNA que serão analisados.
• E. é limitada pela necessidade do uso de isótopos radioativos para a marcação dos fragmentos de DNA que serão seqüenciados.

Gabarito: B

Comentários

• Gabarito B.

   

  O método de Sanger é procedimento tradicional sequenciamento de DNA, foi desenvolvido por Frederick Sanger e colaboradores na década de 70 e consiste na adição de nucleotídeos modificados, chamados didesoxiribonucleotídeos, que impedem o crescimento de um fragmento de DNA em replicação pela DNA polimerase após sua adição. E por que? 

   

  Porque um didesoxinucleotídeo não tem oxidrila ou hidroxila na extremidade 3´. Logo, não é possível haver extensão a partir do nucleotídeo adicionado, parando a reação.