b) O método mais amplamente empregado para quantificar a creatinina fundamenta-se na reação de Jaffe, descrita há mais de 100 anos, com base na reação da creatinina com picrato (Spencer, 1986; Weber, 1991). A solução alcalina intensifica a reação, justificando a denomiriação "método do picrato alcalino".
c) A depuração da inulina é amplamente adotada como padrão-ouro para quantificar a TFG.
d) Essencialmente, existem três métodos de quantificação da ureia. O padrão-ouro, utilizado somente como método referencial por causa de seu custo elevado, é a diluição isotópica por espectrometria de massa (Kessler, 1999). Em laboratórios clínicos, a ureia é quantificada pelo método colorimétrico, com base na reação da ureia com diacetilmonoxima, ou por métodos enzimáticos (Barbour, 1992; Natelson, 1951; Passey, 1980). No primeiro caso, a ureia reage diretamente com diacetil-monoxima sob condições fortemente acídicas, dando origem a um produto de condensação amarelado. A reação é intensificada pela presença de íons férricos e tiosemicarbazida. A intensidade da resultante cor vermelha é medida a 540 nm.
e) As substâncias endógenas amplamente empregadas para determinar a TFG incluem o nitrogênio ureico, creatinina e cistatina C. importante notar que a depuração da cistatina renal não pode ser medida, porque trata-se de uma substância que é totalmente reabsorvida e, portanto, não está presente na urina. Por esse motivo, as alterações da concentração sérica de cistatina C são utilizadas como estimativa indireta da TFG.