O procedimento manual utilizado para a contagem de reticulócitos usa os corantes azul de metileno ou azul de cresil brilhante para corar os restos de RNA mensageiro no citoplasma do reticulócito. Os reticulócitos são identificáveis quando observa-se em microscópio os RNA e as organelas como uma “malha” ou “rede” no interior das células. Reticulócitos mais imaturos são mais fáceis de serem identificados por possuírem mais organelas e consequentemente são mais corados em azul.
Para o procedimento, faz-se uma solução de sangue e corante na proporção 1:1 e após homogeneização, colocar em banho-maria por 15 minutos a 37ºC. Passado esse tempo, é necessário homogeneizar novamente a solução e confeccionar esfregaços/extensões sanguíneas com essa solução.
A contagem deve ser realizada em microscópio com objetiva de imersão e anotar a quantidade de reticulócitos encontrados ao contar mil eritrócitos. A quantidade de reticulócitos encontrados devem ser convertidos a valores relativos em porcentagem.
Para calcular o valor absoluto de reticulócitos, realiza-se o cálculo abaixo:
CRA = CR% x ERT / 100
CRA = Contagem de reticulócitos absolutos (/µL)
CR% = Contagem de reticulócitos relativos
ERT = Número de eritrócitos obtidos do eritrograma
Antes da contagem de reticulócitos pode ser preparado também uma lâmina com contra corante, corando a lâmina já corada com o azul de cresil brilhante ou azul de metileno e em corante hematológico comum como o Panótico ou May-Grüwald-Giemsa.
Reticulócitos mais jovens possuem mais retículos, enquanto os mais maduros possuem menos.
Fonte: https://centraldobiomedicocom.wordpress.com
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