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Os VNTR’s foram usados com sucesso para a tipagem do DNA por mais de 10 anos. No entanto, como as análises de loci de VNTR requerem grandes quantidades de DNA, esta metodologia não é tão eficiente para a tipagem de DNA degradado e amostras com pouca quantidade de DNA como, por exemplo, os preparados de DNA a partir de amostras biológicas coletadas do meio ambiente. Por outro lado, a análise de STR é uma metodologia mais simples que funciona mesmo com DNA em pouca quantidade ou degradado (GÓES, 2002). Essa modalidade de determinação/exclusão de paternidade surgiu no final do século passado. Os STR’s, por serem sequências de DNA menores, permitem a análise de DNA já degradado, tais como, material biológico seco, em decomposição, decomposto ou carbonizado que contém pouco DNA analisável (FILHO, 2007).
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Acho q o gabarito da questão tá errado. P mim seria letra A.
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Tipos de Sondas utilizadas no RFLP
Para análise de regiões hipervariáveis (VNTR) são utilizadas sondas moleculares complementares a estas sequências repetitivas, o que possibilita observar as características de cada indivíduo e suas relações com os pais. No método de RFLP, há sondas multilocais que hibridizam com vários locos ao mesmo tempo, sendo analisadas várias bandas de DNA, que correspondem aos alelos respectivos. Os testes com sondas unilocais utilizam a mesma metodologia, entretanto, identifica-se um loco polimórfico do DNA de cada vez, permitindo com simplicidade observar um alelo de origem materna e outro de origem paterna. O limite de detecção das sondas multilocais é de 500 ng de DNA, as sondas unilocais apresentam limites muito menores onde quantidades em torno de 30 ng podem ser visualizadas, que permitem espécimes de até 1 L de sangue ou sêmem para análise. Essa sensibilidade significa que embora as sondas multilocais fornecerem melhor distinção individual as sondas unilocais são as mais utilizadas no contexto forense. Outra vantagem é a possibilidade do uso das sondas unilocais em amostras misturadas.
03/02/2018
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Acredito que o errado da alternativa A, se dê pela avaliação do STR ocorrer através de um eletroferograma, e não com a simples amplificação em PCR.
Resumidamente os passos são: Extração do DNA --> Amplificação por PCR --> Analise por Eletroforese.
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Gabarito B.
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Pensei que a A estivesse certa, afinal o STR so precisa de PCR, dispensando a eletroforese, uma vez que se pode utilizar o PCR em tempo real.
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Sabemos que o marcador genético polimórfico que é utilizado em banco de dados, atualmente, é o STR. Todavia, a questão perguntou sobre aquele marcador que tem o maior poder informativo. O VNTR tem maior poder discriminativo devido a sua maior quantidade de repetição de nucleotideos nos locus, já para podermos ter o mesmo poder de discriminação ao utilizarmos o STR teremos de realizar a amplificação de mais loci. Esse que é o detalhe da questão, por isso que a alternativa B está correta. Adicionalemente, ele citou sondas unilocais, bandas esses termos estão associados a eletroforese em gel, utilizada na análise de VNTR.
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Realmente, o candidato ficaria em dúvida entre as letras A e B.
Porém, a mais correta seria a letra B visto que como os microssatélites (STRs) possuem menor tamanho que os minissatélites (VNTRs), os STRs apresentam menor polimorfismo e, portanto, menos alelos para um marcador. Dessa forma, seria necessário maior quantidade de STRs analisados para que se atingisse o nível de confiabilidade de análise dos VNTRs. Estima-se que um loco de VNTR analisado com sondas unilocais corresponda a 3 locos de STRs.
"Hoje melhor que ontem, amanhã melhor que hoje"