Questão 1322806

• Banca: CESPE / CEBRASPE
• Órgão: INCA
• Ano: 2010
• Provas: CESPE - 2010 - INCA - Tecnologista Júnior – Imunogenética
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Imunogenética; Imunologia em Biomedicina

Durante muitos anos, os métodos de tipificação do sistema HLA basearam-se em sorologia. Muitos laboratórios ainda utilizam esses métodos. No entanto, os métodos moleculares, devido a sua eficácia e sensibilidade, têm sido largamente utilizados nos laboratórios de histocompatibilidade e pesquisa. Com relação aos métodos de detecção das variantes do sistema HLA, julgue o item subsequente.

Utilizando-se kits comerciais baseados em PCR-SSP (polymerase chain reaction-sequence specific Primer) para tipificar os genes do complexo HLA, a eletroforese em gel de agarose e a exposição à luz UV são empregadas para visualizar os produtos amplificados.

• C. Certo
• E. Errado

Gabarito: C

Comentários

• PCR/SSP (Polymerase Chain Reaction/Sequence Specific Primers) é uma abordagem de genotipagem de DNA com base na utilização de sequências específicas (SSP).

  Consiste de múltiplos iniciadores de PCR específicos para diferentes polimorfismos genéticos. Exemplo: HLA

  1. Coloca-se o DNA em diferentes tubos contendo dois primers PCR
  2. Um dos primers hibridiza uma região conservada do locus HLA, sendo adicionado a todos os tubos
  3. O segundo primer se hibridiza com uma região polimórfica do locus HLA (cada tubo contém um primer de especificidade diferente)
  4. A amplificação do DNA só será observada no tubo contendo o segundo primer específico que corresponde ao alelo (alta resolução) ou ao grupo de alelos (baixa resolução) do HLA na amostra do DNA
  5. Por fim, é utilizada a análise em eletroforese em gel de agarose ou exposição a luz UV.