Questão 1573837

• Banca: UFES
• Órgão: UFES
• Ano: 2015
• Provas: UFES - 2015 - UFES - Farmacêutico
• Disciplina: Farmácia
• Assuntos: Biologia Molecular e Biotecnologia

Considere as seguintes afirmações sobre a reação em cadeia da DNA polimerase (PCR):


I. Segmentos específicos de DNA podem ser facilmente amplificados a milhões de cópias.

II. A PCR pode ser utilizada em medicina forense e diagnósticos clínicos. Produtos da reação de PCR podem ser usados em clonagem.

III. A PCR utiliza uma DNA-polimerase termoestável, porque, para cada etapa de amplificação, o DNA de fita dupla deve ser desnaturado pelo calor.


É CORRETO o que se afirma em: 

• A. I apenas.
• B. II apenas.
• C. I e II apenas.
• D. II e III apenas.
• E. I, II e III.

Gabarito: E

Comentários

• GAB: E

  A PCR conveniente e rápida – bilhões de cópias de um nucleotídeo podem ser geradas em questão de horas;

  A reação em cadeia da polimerase (PCR), fornece uma abordagem mais rápida e direta para clonar DNA, particularmente de organismos cuja sequência genômica completa seja conhecida;

  A extrema sensibilidade do método permite aos investigadores forenses isolar um DNA a partir de traços mínimos de sangue humano ou outro tecido para obter a impressão digital de DNA;

  fonte: Bruce Albert, 6° ed

  Os primeiros experimentos de PCR foram realizados com o fragmento de Klenow da DNA-polimerase I. Nesse caso, a cada passo de desnaturação a enzima era inativada e mais enzima tinha de ser adicionada. Posteriormente, passou-se a utilizar DNA-polimerases termoestáveis, como a Taq e a Pfu-DNA-polimerases, não havendo mais a necessidade de adição de enzima após cada ciclo de desnaturação.

  fonte: ZAHA, 2014

• PARA CADA ETAPA O DNA DEVE SER DESNATURADO? É A PENAS NA PRIMEIRA ETAPA

• A técnica de PCR é dividida em três etapas: Desnaturação; Anelamento dos primers e extensão da cadeia.

  DESNATURAÇÃO: OCORRE EM 95°

  ANELAMENTO: OCORRE EM 60°

  EXTENDE: 72°

• Creio que a banca utilizou AMPLIFICAÇÃO como sinônimo de CICLO na PCR, logo, com o advento de DNA polimerases termoestáveis, como a Taq-polimerase, não era necessário adicionar mais enzimas a cada CICLO, pois as termoestáveis não perdiam sua atividade com as variações de temperatura.