Nas opções abaixo, qual não caracteriza o diagnóstico laboratorial da Talassemia Beta Maior:
A hemoglobina S (Hb S), herdada geneticamente, ocorre devido a uma mutação pontual no gene da cadeia beta da globina. Desta forma, há a substituição de uma base nitrogenada por outra (GAG → GTG), o que leva a troca de um aminoácido na posição 6 da cadeia beta. Marque a opção que caracteriza a substituição de aminoácido que ocorre no referido códon:
Com relação às evidências utilizadas na predição de genes codificantes em genomas procariotos, analise as afirmativas a seguir.
I. Identificação, em outros genomas, de sequências protéicas homólogas as codificada por ORFs (quadros abertos de leitura) presentes no genoma analisado.
II. Identificação de íntrons, trechos ricos em GC e menores que 100 pb, localizados dentro de ORFs presentes no genoma analisado.
III. Comparação do conteúdo de GC e da frequência de códons das ORFs presentes no genoma analisado com a de genes codificantes já descritos para a mesma espécie.
IV. Identificação de junções éxon-íntron nas ORFs presentes no genoma analisado.
Assinale:
Os ensaios moleculares aplicados ao diagnóstico precoce de doenças infecciosas facilitam o tratamento e permitem a individualização de terapias. Entre essas tecnologias, a reação em cadeia da polimerase, do inglês “Polymerase Chain Reaction” (PCR), detecta infecções, quantifica carga viral, além de avaliar a progressão de doenças. Nesse contexto, o vírus HIV pode ser detectado pela técnica PCR, desde que sua amplificação seja proveniente de moldes de :
A metilação do DNA é uma modificação epigenética crucial do genoma que está envolvida na regulação de diversos processos celulares, incluindo o desenvolvimento embrionário, transcrição, estrutura da cromatina, estabilidade cromossômica etc.. Pesquisadores têm demonstrado interesse em desvendar os enigmas e propor novas tecnologias envolvendo essas modificações epigenéticas. Sobre biotecnologia, é incorreto afirmar que:
Os nucleotídios são os constituintes dos ácidos nucléicos: ácido desoxirribonucléico (DNA) e ácido ribonucléico (RNA), sendo esses os depósitos moleculares de informação genética . Uma célula normalmente possui muitos milhares de genes, onde as moléculas de DNA têm como função o armazenamento e a transmissão da informação biológica. De acordo com a estrutura e função dos ácidos nucléicos, pode-se afirmar que:
Julgue o item seguinte com relação aos processos do ciclo celular.
Em condições normais da divisão de células eucariotas, na prófase a quantidade de DNA é duas vezes maior que aquela encontrada na fase G1.
Julgue o item seguinte com relação aos processos do ciclo celular.
Os níveis dos complexos CDK-ciclina oscilam entre as diversas fases do ciclo. Na transição G1/S, a ciclina A começa a ser sintetizada, e o complexo CDK2-ciclina A mostra importante função imediatamente antes da síntese de DNA, fosforilando proteínas específicas envolvidas com as origens de replicação do DNA.
Julgue o item seguinte com relação aos processos do ciclo celular.
O controle da diferenciação celular é associado à regulação da progressão do ciclo celular. A hipofosforilação da proteína RB (pRB) é necessária para interromper a proliferação das células e facilitar sua diferenciação.
Acerca dos mecanismos moleculares envolvidos na carcinogênese e na progressão tumoral, julgue o item que se segue.
A ativação de um proto-oncogene em sua forma agressiva denominada oncogene pode ocorrer de diversas maneiras, incluindo deleções ou mutações pontuais nos éxons, amplificações e translocações cromossômicas.
Acerca dos mecanismos moleculares envolvidos na carcinogênese e na progressão tumoral, julgue o item que se segue.
A perda de heterozigosidade (LOH) de genes como os da família Ras ou c-myc é um dos eventos que podem levar uma célula à carcinogênese, sendo relacionada a vários tipos de tumores.
Acerca dos mecanismos moleculares envolvidos na carcinogênese e na progressão tumoral, julgue o item que se segue.
A hipermetilação em ilhas CpG na região promotora de genes supressores de tumor pode causar a perda na expressão do gene e sua consequente inativação, o que contribui para a progressão tumoral.
O tumor resulta da aquisição progressiva e cumulativa de diversos fatores neoplásicos tais como a autossuficiência em estímulos de crescimento, a insensibilidade a sinais anticrescimento, a capacidade de evasão da apoptose, a capacidade de proliferação irrestrita, a estimulação da angiogênese e a capacidade de invasão de tecidos e metástase.
Douglas Hanahan e Robert A. Weinberg. The hallmarks of cancer cell, vol. 100, Jan. 7, 2000, 57-70 (com adaptações).
Considerando as informações apresentadas no texto acima, julgue o item a seguir.
A mutação pontual no códon codificador do aminoácido 12 no gene H-ras é um exemplo que pode levar à autossuficiência celular em estímulos de crescimento.
A saúde é uma das áreas de maior convergência entre aspectos sociais e econômicos do desenvolvimento, pois condiciona o pleno exercício dos diretos humanos e demanda uma complexa cadeia de bens e serviços de alta tecnologia. Com relação ao complexo industrial da saúde e à incorporação de tecnologias na saúde, julgue o item subsecutivo.
A produção de medicamento de origem biológica, ou seja, feito a partir de material vivo e manufaturado a partir de processos que envolvam biologia molecular, pode ser uma alternativa em relação aos medicamentos tradicionais de síntese química, para o tratamento de algumas doenças.
Considere as seguintes afirmações sobre a reação em cadeia da DNA polimerase (PCR):
I. Segmentos específicos de DNA podem ser facilmente amplificados a milhões de cópias.
II. A PCR pode ser utilizada em medicina forense e diagnósticos clínicos. Produtos da reação de PCR
podem ser usados em clonagem.
III. A PCR utiliza uma DNA-polimerase termoestável, porque, para cada etapa de amplificação, o DNA de
fita dupla deve ser desnaturado pelo calor.
É CORRETO o que se afirma em:
Durante a tradução proteica, os 21 aminoácidos que estão envolvidos na síntese proteica são especificados por uma sequência de 3 nucleotídeos, como um Códon. Dois Códons não codificam aminoácidos, mas o sinal de terminação de síntese proteica (Códons de Parada). Qual alternativa contém uma representação do Códon de Parada?
Com relação ao Controle Estatístico de Processo (CEP), assinale a alternativa incorreta.
A representação gráfica do CEP são as cartas de controle ou
gráficos de controle. A partir da análise de cartas de controle
é possível afirmar que:
I. é possível, através dos dados gerados em uma carta de
controle, avaliar a capacidade do processo. Ainda pode-se
afirmar que um processo sob controle tem baixa
variação e alta capacidade, ou seja a variação dos
dados é inversamente proporcional ao Cp.
II. avalia-se tendência por meio de cartas de controle
quando mais de três pontos encontram-se de um mesmo
lado do gráfico. Quando se evidencia uma tendência, é
necessário parar o processo para avaliar as causas.
III. pontos fora de controle são aqueles que se encontram
fora dos limites de controle superior ou inferior e
obrigatoriamente estão contidos na especificação do
produto final. Ao evidenciarmos pontos fora de controle é
preciso realizar-se investigação detalhada incluindo
métodos analíticos que geraram o resultado, calibração
de instrumentos de medição do processo e analíticos, e a
matéria prima. Para tal investigação, é comum utilizarmos
a ferramenta da qualidade Diagrama de Ishikawa.
Assinale:
O termo “Biossegurança" tem sido aplicado recentemente no
Brasil, como sinônimo não só de aspectos relacionados à
manipulação segura de organismos vivos ou vírus de caráter
patogênico, mas como a manipulação em regime de
contenção e liberação de organismos geneticamente
modificados (OGMs), que resultem em produtos que possam
gerar inclusive a sua comercialização. Em relação ao papel
da CTNBio, analise as afirmativas a seguir.
I. Acompanhar desenvolvimento técnico e científico na área,
objetivando segurança dos consumidores e da
população em geral, com garantia da proteção ao meio
ambiente.
II. Fiscalizar e monitorar os projetos, além de apoiar os
orgãos competentes nas investigações de acidentes e
enfermidades verificadas durante realização.
III. Manter registro de projetos e fazer inspeções das
instalações utilizadas (duas vezes/ano).
Assinale:
Em relação às etapas estratégicas para o desenvolvimento
de imunobiológicos, no caso de vacinas, a cada momento
surgem novos produtos e processos, tais como as vacinas
combinadas e as vacinas baseadas no ADN (ácido
desoxiribonucleico), a exemplo da vacina contra hepatite B.
No entanto um dos fatores cruciais no desenvolvimento das
vacinas baseadas na tecnologia do ADN está na escolha do
sistema de expressão para obtenção do produto final. A esse
respeito, analise as afirmativas a seguir.
I. A definição do microorganismo hospedeiro, a exemplo da
bactéria Escherichia coli, é uma função direta das
características do produto final, ou seja, proteínas que
não necessitem de glicosilação podem ser expressas
neste microorganismo.
II. Dentre os componentes básicos de um sistema de
expressão encontramos: os promotores, a origem de
replicação, o marcador de seleção e um sítio para
clonagem.
III. Uma vantagem do sistema de expressão em Escherichia
coli é a falta de sinal de secreção.
Assinale:
Em relação às etapas estratégicas para o desenvolvimento
de imunobiológicos, várias são as etapas que um protótipo
vacinal precisa cumprir para chegar a um produto no
mercado, dentre elas está a ampliação de escala (scale-up).
A esse respeito, analise as afirmativas a seguir.
I. O desenvolvimento de processos em biorreatores é
geralmente realizado em três escalas: bancada, na qual
procedimentos básicos e parâmetros de processo são
levantados; piloto, na qual as condições de operação são
otimizadas; e industrial, na qual o processo deve ser
economicamente viável.
II. Um dos principais problemas na ampliação de escala é a
taxa de transferência de oxigênio (fase gás-liquido),
quando a velocidade de agitação é pequena, as bolhas
pequenas de oxigênio, provindas do sistema de aeração,
irão circular por todo o biorreator e terão o seu tempo de
residência aumentado.
III. Quando os biorreatores apresentam no seu desenho
chicanas, estas diminuem a taxa de transferência de
oxigênio do sistema.
Assinale:
Uma fábrica de imunobiológicos, pré-qualificada pela Organização Mundial da Saúde (OMS), produz as seguintes vacinas virais: sarampo, caxumba, rubéola e poliomielite com vírus selvagem inativado. As plataformas tecnológicas utilizadas nessas produções consistem na utilização de ovos embrionados para as duas primeiras vacinas e no cultivo estático de células eucarióticas para as outras duas. Em relação à produção dos concentrados virais, pode-se afirmar que:
A Lei Nacional de Biossegurança estabelece normas de segurança e mecanismos de fiscalização sobre a construção, o cultivo, a produção, a manipulação, o transporte, a transferência, a importação, a exportação, o armazenamento, a pesquisa, a comercialização, o consumo, a liberação no meio ambiente e o descarte de organismos geneticamente modificados – OGM e seus derivados, tendo como diretrizes o estímulo ao avanço científico na área de biossegurança e biotecnologia, a proteção à vida e à saúde humana, animal e vegetal, e a observância do princípio da precaução para a proteção do meio ambiente, para efeito da lei, assinale a afirmativa incorreta.
A Rede de Frio é o processo de armazenamento,
conservação, manipulação, distribuição e transporte dos
imunobiológicos do Programa Nacional de Imunizações, e
deve ter as condições adequadas de refrigeração desde o
laboratório produtor até o momento em que a vacina é
administrada mantendo sua eficácia. Sobre o
armazenamento das vacinas virais do calendário nacional de
vacinação de acordo com Programa Nacional de
Imunizações(PNI), analise as afirmativas a seguir.
I. As vacinas liofilizadas contra o sarampo, caxumba e
rubéola (SRC) e a vacina de febre amarela, antes de
reconstituídas, podem ser armazenadas em refrigerador
entre +2 ºC e +8 ºC ou congeladas sob temperatura de
–20 ºC .
II. A vacina oral contra poliomielite (VOP) deve ser
armazenada sob temperatura de –20 ºC para preservar
sua potência por 24 meses.
III. A vacina líquida de hepatite B deve ser armazenada em
refrigerador entre +2 ºC e +8 ºC e não pode ser
congelada.
Assinale:
Na propagação dos vírus da vacina tríplice viral (Sarampo, Rubéola e Caxumba) licenciada para uso na campanha nacional de vacinação, devemos utilizar:
Das cepas listadas a seguir, assinale a utilizada para a produção da vacina de rotavírus licenciada e utilizada nas campanhas nacional de vacinação.
Vírus RNA de fita simples de polaridade negativa com diâmetro aproximado de 100 a 300 nm não segmentado, com um nucleocapsídeo helicoidal e um envelope externo de natureza lipoprotéica. Pertencente ao gênero Morbillivirus da família Paramyxoviridae. A replicação acontece no citoplasma das células infectadas. Estamos falando do vírus vacinal:
A vacina contra a febre amarela é o meio mais eficaz para prevenir e controlar a doença e já faz parte do calendário nacional de vacinação. Assinale a alternativa que corresponde aos excipientes desta vacina.
Com relação a células primárias e células de linhagem,
analise as afirmativas a seguir:
I. As culturas denominadas linhagens celulares podem ser
finitas ou contínuas e têm a capacidade ilimitada de
crescimento e normalmente são derivadas de células
tumorais.
II. Para a produção de uma cultura de célula primária
devemos utilizar amostras de bancos de células
certificado.
III. As células de uma culturas primárias crescem durante
um tempo variável, mas finito em cultura, mesmo quando
oferecido os nutrientes necessários para sua
sobrevivência.
Assinale:
A tecnologia de cultivo de células animais sempre foi de
grande importância para a produção das vacinas virais e
como exemplo podemos citar a vacina atenuada contra a
poliomielite. Analise as afirmativas a seguir, e verifique se são
adequadas para a célula utilizada na produção desta vacina.
I. O substrato de célula utilizado para a propagação dos
vírus é a célula de linhagem contínua Vero - fibroblasto de
rim de macaco.
II. As cepas do vírus são propagadas em célula diplóide
humana - MRC5.
III. A célula de cultura primária MRC5 é a utilizada para a
propagação das cepas de vírus atenuados Sabin.
Assinale:
Analise as afirmativas a seguir.
I. A vacina contra poliomielite oral trivalente é produzida a
partir de vírus atenuados contendo os três tipos de
poliovírus (tipos I, II e III).
II. A primeira dose da vacina de rotavírus deve ser
administrada por via subcutânea aos 12 meses de idade.
III. A vacina febre amarela, utilizada no PNI, é uma vacina de
vírus vivo inativado, obtida pela inativação da subcepa
17DD do vírus da febre amarela, cultivado em ovos de
galinha embrionados livres de germes patogênicos.
Assinale:
Uma vacina viral inativada usualmente utilizada no Brasil é:
Sobre criopreservação e armazenamento de linhagens
celulares, analise as afirmativas a seguir.
I. Quando uma célula é exposta a baixas temperaturas,
geralmente acontece formação de cristais de gelo
podendo romper a membrana celular e acarretar na
morte da célula.
II. Para que as células sejam protegidas do processo de
congelamento e descongelamento devem ser tratadas
com um agente crioprotetor como o EDTA.
III. O armazenamento em nitrogênio líquido é a melhor forma
de estocar células de modo a preservar a capacidade
proliferativa e a viabilidade celulares.
Assinale:
No processo de produção de antígenos para vacinas virais uma das etapas é a clarificação/purificação. Identifique os métodos que podem ser utilizados para a execução desta etapa:
A Vacina combinada contra Sarampo, Caxumba e Rubéola é
uma preparação mista liofilizada das cepas de vírus
atenuados de sarampo, caxumba e rubéola, separadamente
obtidas por propagação, em culturas de tecido de ovos
embrionados de galinha (caxumba e sarampo) ou células
diplóides humanas (rubéola).
As cepas utilizadas na vacina tríplice viral em uso no Brasil são:
O cultivo de células animais em bioreatores é amplamente
utilizado na produção de vacinas virais. Com relação ao tema
bioreatores, analise as afirmativas a seguir.
I. Quando construído em aço inox as superfícies em
contato com o produto devem ser fabricadas com aço
inox 316L.
II. Cell factory e garrafas rotatórias são exemplos de
bioreatores com crescimento sobre superfícies.
III. Na operação dos bioreatores, é fundamental garantir um
ambiente físico-químico heterogêneo.
Assinale:
A infecção por HPV pode ser prevenida por meio da
vacinação. Sobre o tema, analise as afirmativas a seguir.
I. Pode ser propagado em células in vitro.
II. Pode causar desde infecções assintomáticas em
humanos até neoplasias.
III. É um vírus DNA não envelopado.
Assinale:
Em relação ao modo de operação em batelada utilizada no
processo de cultivo de células animais e microrganismos em
bioreatores, analise as afirmativas a seguir:
I. É também conhecido como perfusão.
II. É um modo de operação descontínuo, no qual ocorre o
crescimento da população celular sem qualquer
suplemento adicional de substrato após a inoculação das
células.
III. É um modo de operação caracterizado pela adição
contínua de meio de cultivo novo e remoção de meio
cultivado contendo células, ambas as operações
ocorrendo na mesma vazão, de tal forma a garantir o
volume constante no bioreator.
Assinale:
O processo de filtração é um método de esterilização amplamente utilizado na produção de suspensões virais, estabilizadores e/ou meios de cultura. Em relação ao tema esterilização por filtração, analise as afirmativas a seguir.
I. É recomendável a utilização de filtros esterilizantes redundantes (dois filtros em série) ou um filtro esterilizante adicional imediatamente após o envase.
II. A integridade do filtro deve ser conferida por um método apropriado, tal como o ensaio de ponto de bolha,imediatamente após o uso.
III. A filtração esterilizante deve ser realizada com filtros previamente esterilizados com especificação de poro de 0.45 μ(ou menor).
Assinale:
Com relação ao vírus causador da Rubéola e Síndrome da
Rubéola Congênita, analise as afirmativas abaixo.
I. Pode ser propagado em diversos tipos de células de
mamíferos in vitro.
II. A transmissão é realizada com auxílio de inseto vetor.
III. É um vírus grande, envelopado, com genoma DNA
pertencente ao gênero Rubivirus.
Assinale:
Em relação ao preparo do meio de cultura para o cultivo de
células utilizadas na produção de vacinas virais, analise as
afirmativas a seguir.
I. As balanças e instrumentos de medida das áreas de
produção e de controle de qualidade devem possuir a
faixa de trabalho e a precisão requeridas, devendo ser
periodicamente calibrados.
II. As matérias primas pesadas ou medidas, bem como
seus respectivos pesos ou volumes, devem ser
conferidos por outro funcionário ou sistema automatizado
de conferência, devendo ser mantidos os registros.
III. Pode ser utilizada água potável estéril rigorosamente
monitorada na sua qualidade e no atendimento à
especificação.
Assinale:
A produção de efeito citopático (CPE) em células
susceptíveis é uma importante forma de detecção da
produção viral. Em relação ao tema CPE, analise as
afirmativas a seguir.
I. São produzidos por uma grande variedade de viroses
humanas, inclusive cepas vacinas, como exemplo, a cepa
Schwarz.
II. Os efeitos podem ser observados com auxílio de
microscópio simples.
III. Mudanças morfológicas, como a formação de sincício e
corpos de inclusão, são efeitos comuns.
Assinale:
Uma grande preocupação na indústria biofarmacêutica é o
problema da contaminação por endotoxinas (LPS),
componente estrutural de paredes celulares de bactérias
gram-negativas, também conhecidas como pirogênio,
principalmente por suas conseqüências à saúde humana. Em
relação ao tema, analise as afirmativas a seguir
I. A utilização de fornos especiais é um dos métodos mais
utilizados para eliminação da endotoxina em vidrarias.
II. A endotoxina é notoriamente resistente à destruição pelo
calor, dessecação, pH extremos e vários tratamentos
químicos, por isso a validação do processo de destruição
ou remoção da endotoxina na produção de injetáveis é
um fator crítico para o fabricante.
III. O controle de endotoxinas deve ocorrer desde a água de
formulação até o produto acabado. Por esta razão, a
utilização de materiais apirogênicos deve ser prioridade
nos processos de produção.
Assinale:
O cultivo celular em grande escala é uma das principais
etapas da produção de antígenos virais para uso em vacinas.
Em relação à produção de células para uso em vacinas
humanas, análise as afirmativas a seguir.
I. Alterações das condições ambientais do meio de cultivo
podem resultar em perda da viabilidade das células.
II. A utilização de soro animal, ainda exerce importante
papel no crescimento e sobrevivência das células animais
in vitro.
III. A quantidade de células, assim como o número de
passagens em cultura são informações críticas na
produção.
Assinale:
Considerando as vacinas virais disponíveis atualmente na
rotina do Programa Nacional de imunização, analise as
afirmativas a seguir:
I. As vacinas de febre amarela e poliomielites são
classificadas como vacinas de primeira geração
II. A vacina de DNA de rotavírus foi a última vacina viral
incorporada ao Programa
III. As vacinas virais disponíveis no Programa são todas de
vírus atenuados.
Assinale:
Assinale:
Assinale:
Assinale:
A Lei Nacional de Biossegurança estabelece normas de segurança e mecanismos de fiscalização sobre a construção, o cultivo, a produção, a manipulação, o transporte, a transferência, a importação, a exportação, o armazenamento, a pesquisa, a comercialização, o consumo, a liberação no meio ambiente e o descarte de organismos geneticamente modificados – OGM e seus derivados, tendo como diretrizes o estímulo ao avanço científico na área de biossegurança e biotecnologia, a proteção à vida e à saúde humana, animal e vegetal, e a observância do princípio da precaução para a proteção do meio ambiente, para efeito da lei, assinale a afirmativa incorreta.
Com relação à esterilização de meios de cultura para a produção de vacinas bacterianas, analise as afirmativas a seguir.
I. As fontes de carbono e nitrogênio orgânico nunca devem ser esterilizadas juntas.
II. A esterilização por calor de meios de cultura contendo açúcares e fontes de nitrogênio orgânico pode levar ao escurecimento do meio e perda nutricional.
III. Numa esterilização por filtração, sempre o filtro deve ser esterilizado previamente por outro método.
Assinale:
Após a calibração do sensor de oxigênio dissolvido de um biorreator nos valores de 0 e 100% da saturação, estando o biorreator contendo meio de cultura estéril à temperatura de cultivo, na qual foi realizada a calibração de 100%, observou-se a leitura do sensor de oxigênio em 115% da saturação.
O técnico responsável pela operação descartou a hipótese de que o sensor estivesse danificado, pois:
I. a velocidade de agitação à qual o meio estava sendo submetido era superior à velocidade utilizada para a calibração, levando a uma dissolução de valor maior do que a saturação.
II. após a calibração do 100%, o meio de cultivo havia sido submetido à aeração por um tempo muito longo antes da inoculação, o que levou a dissolução de valores maiores do que a saturação.
III. a vazão de ar utilizada no momento da medida era maior do que a aplicada no momento da calibração, o que levou à pressão no interior do biorreator ser ligeiramente maior, aumentando a concentração de saturação na temperatura do cultivo.
Assinale:
Assinale:
Assinale:
Na fabricação de um ingrediente farmacêutico ativo (IFA), a partir de células procarióticas, são utilizados os seguintes equipamentos e sistemas, dentre outros, nas suas várias etapas do processo: agitador orbital de frascos, fermentador de 500 litros, centrífuga industrial, colunas cromatográficas, sistemas de filtração tangencial e sistemas de filtração esterilizante. Essa produção é certificada de acordo com as norma da ANVISA. Em relação aos ambientes em que esses equipamentos e sistemas operam podemos afirmar que:
I. o preparo do inóculo e a fermentação ocorrem em área com pressão negativa classe grau B e as etapas cromatográficas ocorrem em áreas com pressões positivas também classe grau B.
II. os sistemas de filtração esterilizante são operados em módulo de fluxo laminar localizado em sala com pressão positiva e classe grau B.
III. todas as etapas de obtenção do IFA estéril podem ser realizadas em área classe grau C.
Assinale:
Em relação às etapas estratégicas para o desenvolvimento de imunobiológicos, no caso de vacinas, a cada momento surgem novos produtos e processos, tais como as vacinas combinadas e as vacinas baseadas no ADN (ácido desoxiribonucleico), a exemplo da vacina contra hepatite B. No entanto um dos fatores cruciais no desenvolvimento das vacinas baseadas na tecnologia do ADN está na escolha do sistema de expressão para obtenção do produto final. A esse respeito, analise as afirmativas a seguir.
I. A definição do micro-organismo hospedeiro, a exemplo da bactéria Escherichia coli, é uma função direta das características do produto final, ou seja, proteínas que não necessitem de glicosilação podem ser expressas neste micro-organismo.
II. Dentre os componentes básicos de um sistema de expressão encontramos: os promotores, a origem de replicação, o marcador de seleção e um sítio para clonagem.
III. Uma vantagem do sistema de expressão em Escherichia coli é a falta de sinal de secreção.
Assinale:
Em relação às etapas estratégicas para o desenvolvimento de imunobiológicos, várias são as etapas que um protótipo vacinal precisa cumprir para chegar a um produto no mercado, dentre elas está a ampliação de escala (scale-up). A esse respeito, analise as afirmativas a seguir.
I. O desenvolvimento de processos em biorreatores é geralmente realizado em três escalas: bancada, na qual procedimentos básicos e parâmetros de processo são levantados; piloto, na qual as condições de operação são otimizadas; e industrial, na qual o processo deve ser economicamente viável.
II. Um dos principais problemas na ampliação de escala é a taxa de transferência de oxigênio (fase gás-liquido), quando a velocidade de agitação é pequena, as bolhas pequenas de oxigênio, provindas do sistema de aeração, irão circular por todo o biorreator e terão o seu tempo de residência aumentado.
III. Quando os biorreatores apresentam no seu desenho chicanas, estas diminuem a taxa de transferência de oxigênio do sistema.
Assinale:
Uma fábrica de imunobiológicos, pré-qualificada pela Organização Mundial da Saúde (OMS), produz as seguintes vacinas virais: sarampo, caxumba, rubéola e poliomielite com vírus selvagem inativado. As plataformas tecnológicas utilizadas nessas produções consistem na utilização de ovos embrionados para as duas primeiras vacinas e no cultivo estático de células eucarióticas para as outras duas. Em relação à produção dos concentrados virais, pode-se afirmar que:
A Lei Nacional de Biossegurança estabelece normas de segurança e mecanismos de fiscalização sobre a construção, o cultivo, a produção, a manipulação, o transporte, a transferência, a importação, a exportação, o armazenamento, a pesquisa, a comercialização, o consumo, a liberação no meio ambiente e o descarte de organismos geneticamente modificados – OGM e seus derivados, tendo como diretrizes o estímulo ao avanço científico na área de biossegurança e biotecnologia, a proteção à vida e à saúde humana, animal e vegetal, e a observância do princípio da precaução para a proteção do meio ambiente, para efeito da lei, assinale a afirmativa incorreta.
Tipicamente, um processo de purificação de uma proteína é composto por múltiplas etapas. O tempo de processamento, os grandes volumes e os custos elevados são fatores limitantes para a produção industrial de proteínas terapêuticas. Analise as afirmativas a seguir.
I. No leito expandido, após o equilíbrio da fase estacionária (resina/adsorvente) com tampão a amostra é aplicada de cima para baixo.
II. O Sistema de leito expandido permite a adsorção de amostras contendo materiais particulados e/ou células, oriundas seja do plasma sangüíneo, de cultivos de cultura de células, de cultura de microrganismos, extratos de tecidos ou mesmo de células rompidas.
III. O tempo para que uma proteína alvo seja adsorvida pelo sistema de leito expandido, depende do fluxo de aplicação da amostra, bem como da quantidade de resina que foi utilizada para se fazer a expansão (tempo de retenção).
Assinale:
Assinale:
Assinale:
A Lei Nacional de Biossegurança estabelece normas de segurança e mecanismos de fiscalização sobre a construção, o cultivo, a produção, a manipulação, o transporte, a transferência, a importação, a exportação, o armazenamento, a pesquisa, a comercialização, o consumo, a liberação no meio ambiente e o descarte de organismos geneticamente modificados – OGM e seus derivados, tendo como diretrizes o estímulo ao avanço científico na área de biossegurança e biotecnologia, a proteção à vida e à saúde humana, animal e vegetal, e a observância do princípio da precaução para a proteção do meio ambiente, para efeito da lei, assinale a afirmativa incorreta.
Com relação a Biofármacos, analise as afirmativas a seguir.
I. Para aprovar o produto são enviadas amostras para analise de atividade biológica.
II. Na formulação de biofármacos, o produto não precisa ser refrigerado para manter a sua atividade biológica dentro da faixa estabelecida.
III. Durante a formulação, as condições de temperatura pressão e umidade não precisam ser anotadas nos protocolos, deve-se registrar apenas as variações de condições ambientais.
Assinale:
Na atualidade os principais sistemas de expressão de proteínas recombinantes são: bactérias (E. coli), leveduras e fungos, células de insetos, células vegetais e células de mamíferos. Entretanto, o processamento dos oligossacarídeos por esses diferentes tipos de células gera uma heterogeneidade de formas estruturais pela adição de glicanos à cadeia polipeptídica (modificações pós-traducionais), que deve ser monitorada em um bioprocesso desenvolvido para a produção de um biofármaco. Entre as estruturas de N-glicanos típicos predominantes nesses tipos de células, as células vegetais apresentam uma estrutura:
No operon lac durante o controle da expressão genética em procariotas, se a lactose estiver presente, acontece:
A função de um vetor na engenharia genética do DNA recombinante é:
Os marcadores moleculares incluem:
I. isoenzimas que permitem a identificação ou a
diferenciação de organismos.
II. sequências de DNA codificadoras de enzimas-repórter,
facilitando a avaliação da eficiência de transformação ou
da função de sequências reguladoras de DNA.
III. genes capazes de conferir resistência a antibióticos.
Assinale:
No que se refere a xenobióticos, assinale a opção correta.
O ácido desoxirribonucleico é especificamente útil como marcador biológico nas identificações porque
No estudo do cariótipo humano usando a técnica de bandeamento por Giemsa, em que fase do ciclo celular os cariótipos podem ser observados mais facilmente por estarem na sua forma mais condensada?
Qual é a doença que, associada a um tipo de mutação, resulta de uma translocação recíproca entre o gene c-abl no cromossomo 9 e uma região denominada de ponto de quebra de grupo (bcr) no cromossomo 22?
A técnica de western blotting (Towbin et al. 1979; Burnette 1981; Towbin and Gordon 1984) também pode ser denominada protei n immunoblot e consiste na detecção de proteínas específicas em amostras de lisados celulares ou amostras de tecidos. Com base nessa técnica, julgue as afirmativas e marque a alternativa CORRETA.
I- Os passos para a elaboração dessa técnica podem ser resumidos em cinco etapas: (1) extração e quantificação das proteínas; (2) fracionamento das proteínas da amostra em um gel de poliacrilamida; (3) transferências dessas proteínas para uma membrana; (4) incubação da membrana com um anticorpo para detectar a proteína específica a ser analisada; e (5) revelação dessa membrana para análise dos dados.
II- Diversos métodos espectroscópicos são utilizados para quantificar proteínas em uma solução. O ensaio de Bradford é o mais utilizado e apresenta diversas vantagens em relação aos demais, como a rapidez, a não exigência de aquecimento e a alta sensibilidade para baixas concentrações de proteínas. O método de Bradford se baseia na mudança de cor do corante Coomassie Blue G-250, em solução ácida (cor azulada) para cor avermelhada na presença de proteínas. As interações hidrofóbicas e iônicas estabilizam o complexo proteína-corante.
III- Para separar as proteínas de uma amostra homogênea, a técnica mais utilizada é a eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida (SDS-PAGE). Inicialmente prepara-se o gel de SDS-poliacrilamida, que será uma matriz inerte através da qual as proteínas poderão migrar. O gel é preparado pela polimerização de monômeros de acrilamida e o tamanho dos poros do gel pode ser ajustado variando a concentração da acrilamida adicionada para retardar a migração da sua proteína de interesse. As proteínas podem possuir cargas positivas ou negativas, dependendo das cargas dos aminoácidos que as compõem.
IV- Para visualizar uma proteína de interesse, é utilizado um anticorpo específico que vai reagir com um epítopo da proteína, formando um complexo anticorpoantígeno. Esse anticorpo é denominado anticorpo primário, que pode ser policlonal (reconhece mais de um epítopo) ou monoclonal (reconhece apenas um epítopo da proteína de interesse) e é geralmente obtido apenas em camundongo ou em coelho.
Relacione as colunas e marque alternativa CORRETA.
I. RNAm
II. RNAt
III. RNAr
1. Cada um corresponde a uma sequência de bases do RNA mensageiro.
2. É formado a partir de regiões específicas de alguns cromossomos, chamadas regiões organizadoras de nucléolo.
3. É um único filamento de RNA, que se forma tendo um filamento de DNA como molde e é complementar a ele.
4. Também pode ser chamado RNA de transferência ou RNA solúvel.
Na área forense, as técnicas de biologia molecular vêm se fortalecendo no transcorrer dos últimos vinte e cinco anos. Isso em função do desenvolvimento de técnicas cada vez mais sofisticadas e em número cada vez maior. Esta evolução somente foi possível pelo desenvolvimento e compreensão da biologia molecular e a descoberta de novas técnicas e métodos eficazes para a detecção do DNA humano, para fins forenses. Julgue as afirmativas a seguir e marque a alternativa CORRETA.
I- Os polimorfismos de comprimento incluem regiões que se repetem no DNA genômico e são chamados de microssatélites (STRs) e minissatélites (VNTRs).
II- Os polimorfismos de sequência constituem-se de diferentes nucleotídeos em uma determinada localização no genoma, sendo que suas variações podem ser manifestadas como regiões de alelos alternativos, substituições, adições ou deleções de bases.
III- Os VNTRs (do inglês, Variable Number of Tandem Repeats) são sequências curtas de bases que ocorrem em números variáveis dentro do grupo de repetições in tandem. O número de repetições encontradas varia de um local para outro dentro do genoma e também varia entre indivíduos. Podendo, assim, ser diferenciados pelo comprimento de sequência VNTR do DNA.
IV- Os STRs (do inglês, Short Tandem Repeats) são nucleotídeos alinhados, em curtas repetidas, organizados em sequência. Estes são trechos de DNA constituídos em unidades repetidas de dois, três ou quatro nucleotídeos e localizados dentro de regiões de sequência única com número menor do que 100 pares de nucleotídeos. Cada região genômica que contém determinado número de repetições de uma sequência constitui um loco genético, que varia entre os indivíduos e também é multialélico.
V- O que difere entre os VNTRs dos STRs é
o tamanho, ou seja, o número de bases,
sendo que os STRs contêm muitos pares
de bases. Esta característica permite que
sejam analisadas quantidades maiores de
DNA, enquanto que, para a análise dos
VNTRs, é necessário menor quantidade e
qualidade do DNA, sendo, por isso, mais
utilizado para investigação forense,
quando só se encontram vestígios de
DNA.
“O Ministério da Saúde implantou no Brasil, em 2014, a Rede de Teste Rápido para a Tuberculose, que utiliza a reação da polimerase em cadeia como técnica de biologia molecular em tempo real. O teste detecta a presença do bacilo causador da doença em duas horas e identifica se há resistência ao antibiótico __________”.
(BRASIL, 2014.)
Assinale a alternativa que completa corretamente a lacuna.
Amostras múltiplas são aplicadas em poços separados em uma das extremidades de um meio de separação sólido e poroso (gel). Quando a voltagem é aplicada, as amostras se movem linearmente na direção do eletrodo positivo, com cada poço de amostra formando uma tira de migração bem definida. São utilizados padrões de tamanho, misturas de fragmentos de ácidos nucleicos de comprimentos conhecidos, para determinar o tamanho das moléculas de interesse a partir da comparação entre a distância da migração com o padrão em escala. (HENRY, 2013. Adaptado)
O texto apresentado se refere a qual técnica de biologia molecular para diagnóstico de doenças humanas?
O exemplo clássico de fármacos biotecnológicos são proteínas obtidas pela tecnologia do ácido desoxirribonucleico recombinante (DNAr). Contudo, a biotecnologia atual compreende o uso de cultura de tecidos, células vivas ou enzimas celulares para a obtenção de um produto específico, como nas tecnologias do DNAr e de anticorpos monoclonais (AcMs), entre outros...
De acordo com ANSEL, Howard C. et al, abaixo estão alguns exemplos de produtos biotecnológicos e suas indicações. Assinale a alternativa incorreta: