Questão 1704112

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Operação de Laboratório de Nível de Segurança
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

O estabelecimento de uma reação de PCR para o diagnóstico molecular de agentes infecciosos a partir de amostras biológicas muitas vezes apresenta como maior dificuldade a amplificação específica do fragmento genômico do patógeno de interesse. As afirmativas a seguir enumeram possibilidades para aumentar a especificidade da reação.

I. Aumento da concentração de deoxinucleotídeo na reação de PCR.

II. Aumento da concentração da DNA polimerase na reação de PCR.

III. Realização de reações de PCR aninhadas (PCR-nested), utilizando par de iniciadores mais externos à região de interesse na primeira reação, seguido da utilização de par de iniciadores mais internos.

Assinale: 

• A. se somente a afirmativa I estiver correta.
• B. se somente a afirmativa II estiver correta.
• C. se somente a afirmativa III estiver correta.
• D. se somente as afirmativas I e II estiverem corretas.
• E. se todas as afirmativas estiverem corretas.

Gabarito: C

Comentários

• Uma vez que o quesito pediu para "aumentar a especificidade da reação", de cara é possível cancelar os íteis I e II, visto que a DNA Polimerase e os deoxirribonucleotídeos são inespecíficos. Eles podem, talvez, alterar a sensibilidade. 

• Aumentar a concentração do produto da PCR é diferente de aumentar a especificidade.

  A primeira é só pensar numa banda clarinha, em que claramente faltou reagentes na reação.

  A segunda diz respeito a produção de um produto de amplificação o mais exclusivo possível de um fragmento de interesse.