Sobre o preparo de amostras a serem observadas em
microscópio eletrônicos de transmissão, analise as
afirmativas a seguir.
I. O glutaraldeído é utilizado como fixador primário devido a
sua habilidade de estabelecer ligações entre proteínas
através dos seus grupos aldeídos, o que torna esta
molécula bi-funcional. Especificamente, os grupamentos
aldeídos do glutaraldeído reagem com lisinas em
proteínas adjacentes, além de interagirem com lipídeos,
carboidratos e ácidos nucléicos.
II. O tetróxido de ósmio é um fixador secundário e se liga
especificamente à proteínas promovendo a sua
agregação. Protocolos de visualização dos microtúbulos
celulares incluem a fixação por tetróxido de ósmio a 4°C.
Além disto, este metal pesado acrescenta densidade e
contraste ao tecido biológico.
III. Um protocolo geral para preparação de amostras envolve
a fixação primária com glutaraldeido; lavagem em
tampão; fixação secundária com tetróxido de ósmio;
desidratação com séries de alcoóis (30%, 50%, 70%, 95%
e absoluto); transição para solvente óxido de propileno;
infiltração da resina com um aumento progressivo das
concentrações de óxido de propileno e diminuição das
concentrações da resina e finalmente secagem.
Assinale:
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