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ID
1706224
Banca
FGV
Órgão
FIOCRUZ
Ano
2010
Provas
Disciplina
Biomedicina - Análises Clínicas
Assuntos

Para a extração de RNA/DNA, uma das etapas mais importante é a eliminação das proteínas durante o processo de purificação. Para a eliminação de proteínas na extração de RNA/DNA, assinale a afirmativa inadequada.

Alternativas
Comentários
  •  a) Digestão das amostras com a enzima proteinase K. CORRETA. Proteinase K desnatura proteínas.

     b) Extrações com misturas de solventes orgânicos como fenol e clorofórmio por repetidas vezes. CORRETA. Permitem a separação do DNA no sobrenadante enquanto as proteínas ficam na camada intermediária.

     c) Solubilização em tampões de guanidina. CORRETA. O método de extração de DNA por guanidina está baseado nas propriedades de ligação de partículas de sílica ao DNA na presença de tiocianato de guanidina, que tem ação caotrópica e de inativação de nucleases. A técnica baseia-se na alteração de pH. Em condições de pH baixo (obtido pela adição de HCl), a sílica tem carga positiva para aderir à estrutura principal de ácidos nucleicos, carregados negativamente. 

     d) Precipitação salina. CORRETA. Técnica de salting-out que consiste na adição de grandes quantidades de sal, que causam a precipitação de macromoléculas como as proteínas, enquanto o DNA permanece em solução aquosa.

     e) Solubilização em tampões ácidos (pH menor que 3,5). ERRADA