I. Embora incomum, pode haver anemia hemolítica autoimune com teste de Coombs direto negativo.
Resultados falso-negativos ocorrem quando a titulação de anticorpos nos eritrócitos é baixa. Portanto, sempre deve-se correlacionar os resultados com os sintomas e sinais clínicos.
II. A antiglobulina recomendada para um teste de Coombs deve ser poliespecífica e conter anti‐IgG e anti‐C3d.
Usa-se o teste direto de antiglobulina (Coombs direto) para determinar se o anticorpo de ligação de eritrócitos (IgG) ou complemento (C3) está presente nas membranas dos eritrócitos. Os eritrócitos do paciente são incubados com anticorpos anti-IgG humana e C3. Se a IgG ou o C3 estiverem ligados às membranas dos eritrócitos, ocorre aglutinação — que configura resultado positivo. Um resultado positivo sugere a presença de autoanticorpos nos eritrócitos. Um falso positivo pode ocorrer e nem sempre equivale à hemólise. Portanto, os resultados sempre devem estar correlacionados com os sinais e sintomas clínicos.
III. O uso de antiglobulinas humanas monoespecíficas é sempre requerido para a confirmação da positividade de um teste de Coombs direto.
No Coombs direto é utilizado antiglobulinas humanas poliespecífcas para detectar o IgG e o C3d nos eristrócitos, O uso de uma antiglobulina monoespecífica não garantiria um resultado confiável.