Questão 2259340

• Banca: IFB
• Órgão: IFB
• Ano: 2016
• Provas: IFB - 2016 - IFB - Técnico em Laboratório - Biologia
• Disciplina: Biologia
• Assuntos: Moléculas, células e tecidos

A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma reação de amplificação do material genético. Suponha que você deva fazer uma reação de amplificação com volume final de 50 microlitros, utilizando 5 microlitros de tampão 10X; 3,0 microlitros de MgCl₂ a 50 mM; 2,0 microlitros de desoxirribonucleotídeos (dNTP) a 10 mM; 0,5 microlitros do Iniciador 1 a 20 mM; 0,5 microlitros do iniciador 2, a 20 mM; 0,5 microlitros de Taq DNA polimerase a 6 Unidades por microlitro; 3 microlitros de DNA a uma concentração de 150 ng por microlitro; e 14,5 microlitros de água. Qual a concentração final de cada reagente supracitado?

• A. Tampão: 1 X; MgCl_₂: 3mM; dNTPs: 0,4 mM; Iniciador 1: 0,2 mM; Iniciador 2: 0,2 mM; TaqDNA polimerase: 3 unidades por microlitro. DNA: 450 ng.
• B. Tampão: 0,5X; MgCl_{₂: 1,5mM; dNTPs: 0,2 mM; Iniciador 1: 0,1 mM; Iniciador 2: 0,1 mM; Taq DNA polimerase: 1,5 unidades por microlitro. DNA: 225 ng.}
• C. Tampão: 2X; MgCl₂: 6mM; dNTPs: 0,8 mM; Iniciador 1: 0,4 mM; Iniciador 2: 0,4 mM; Taq DNA polimerase: 3 unidades por microlitro. DNA: 850 ng.
• D. Tampão: 1X; MgCl₂: 1,5mM; dNTPs: 0,2 mM; Iniciador 1: 0,4 mM; Iniciador 2: 0,4 mM; Taq DNA polimerase: 1,5 unidades por microlitro. DNA: 450 ng.
• E. Tampão: 2,0X; MgCl₂: 3,0 mM; dNTPs: 0,4 mM; Iniciador 1: 0,2 mM; Iniciador 2: 0,2 mM; Taq DNA polimerase: 1,5 unidades por microlitro. DNA: 850 ng.

Gabarito: A

Comentários

• Só usar o C1xV1=C2xV2.

  O C2 o que se quer descobrir (concentração final).

  Para o tampão: 10 x 5 = C2 x 50 = 1X

  Para o MgCl2: 50 x 3 = C2 x 50 = 3mM

  Para o dNTP: 10 x 2 = C2 x 50 = 0,4 mM

  Restando apenas a letra A como correta.