Questão 2739796

• Banca: NUCEPE
• Órgão: PC-PI
• Ano: 2018
• Provas: NUCEPE - 2018 - PC-PI - Perito Criminal – Biologia
• Disciplina: Biologia
• Assuntos: Hereditariedade e diversidade da vida

Em investigações criminais, alguns fios de cabelo, células da pele, sangue ou outros fluidos corporais podem ser deixados no local e o DNA recolhido a partir dessas amostras tem a capacidade de indicar a solução do crime. Muitas vezes a quantidade de DNA disponível para análise é limitada, contudo com a técnica de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR), o menor vestígio de DNA encontrado pode ser amplificado, aumentando a quantidade de material e proporcionando o suficiente para traçar o perfil genético e assim garantir a análise. A respeito da técnica de PCR, assinale a opção CORRETA.

• A. As etapas utilizadas para realizar a PCR são a desnaturação, extensão (Taq polimerase) e anelamento (primers) nesta ordem.
• B. Na PCR convencional, o resultado é comumente analisado por meio de uma eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida.
• C. Para realizar a PCR é necessário utilizar apenas o DNA a ser amplificado, Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs).
• D. A PCR convencional permite a quantificação dos produtos por meio de fluorescência.
• E. Atualmente, devem-se adicionar enzimas de polimerização a cada etapa de desnaturação.

Gabarito: B

Comentários

• O processo por etapas se dá da seguinte maneira e de modo simplificado: A amostra de DNA, a enzima DNA polimerase, os nucleotídeos e primers são colocados no tubo de ensaio.Este é colocado na máquina PCR e aquecido a 94 graus C para DESNATURAR o DNA. Esfria-se o tubo até 54 graus C onde os primers se ANELAM e servirão de iniciadores para a enzima DNA polimerase. Aquece-se novamente o tubo a 72 graus C para que ocorra a duplicação da fita. Os nucleotídeos vão se ligando e formando uma nova fita, completando a fase de EXTENSÃO. Ao final do processo, utiliza-se gel de agarose corado com Brometo de Etídio. Pode ser observado em tempo real também mas com uso de fluorescência. Portanto o processo passa por Desnaturação, anelamento ou hibridação e extensão ou polimerizaçao, respectivamente. Bons estudos!!!! 

• A- a ordem correta é desnaturção, anelamento e extensão.

  B-correto

  C- Além da Taq polimerase e nucleotídeos (dNTPs), é necessários o uso de Primers e DNA molde.

  D- Não faz uso de fluorescência. A técnica que faz uso de fluorescência é a PCR em tempo real, geralente Taqman ou Sybr green

  E- Essa alternativa me deixou confuso, mas acredito que o erro dela seja dizer que há necessidade de add enzimas, no caso a Taq polimerase, a cada etapa de desnaturação. Quando na verdade só há uma etapa de desnaturação e, além do mais, até onde eu conheço, a enzima só é add no início do processo e é submetida a aquecimento e resfriamento em sequência.