Questão 4083601

• Banca: COPESE - UFPI
• Órgão: UFPI
• Ano: 2014
• Provas: COPESE - UFPI - 2014 - UFPI - Biólogo
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

Sobre a técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), todas as opções estão corretas, EXCETO:

• A. Antes da PCR, a detecção de polimorfismos se dava por sondas marcadas radioativamente ou quimicamente, as quais eram hibridizadas em membrans contendo DNA-alvo.
• B. Uma PCR tipicamente realiza-se em volumes pequenos, de 10 a 100 microlitros, e a quanrtidade de DNA a ser adicionada depende da quantidade estimada de DNA-alvo que exista na amostra.
• C. Um dos fatores mais importantes que influenciam a técnica da PCR é a complexidade do genoma a ser estudado, como por exemplo: em 1ng de DNA de E. coli, existem aproximadamente 240.000 genomas, enquanto que, na mesma quantidade de DNA humano, existem apenas cerca de 300 genomas.
• D. O tamanho do fragmento que será amplificado não influencia o sucesso da reação. Entretanto, o ideal é que os fragmentos a serem amplificados possuam acima de 6 mil pares de bases.
• E. O pH ideal de uma PCR é 7,5, pois enzimas polimerases Taq do DNA têm seu ótimo nessa faixa. Entretanto, os tampões utilizados têm valores mais altos de pH em temperatura ambiente (8,5 à 9,0).

Gabarito: D

Comentários

• “A maioria dos métodos de PCR amplifica os fragmentos de DNA entre 0,1 e 10 quilos de base (kbp), embora algumas técnicas permitam a amplificação de fragmentos de até 40 kbp de tamanho. A quantidade de produto amplificado é determinada pelos substratos disponíveis na reação, que se tornam limitantes à medida que a reação progride.” Vi no Wikipédia.

• O tamanho do fragmento que será amplificado não influencia o sucesso da reação. Entretanto, o ideal é que os fragmentos a serem amplificados possuam acima de 6 mil pares de bases.