Questão 5159464

• Banca: Unoesc
• Órgão: Prefeitura de Treze Tílias - SC
• Ano: 2020
• Provas: Unoesc - 2020 - Prefeitura de Treze Tílias - SC - Farmacêutico
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

A reação da cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica de biologia molecular que permite o desenvolvimento do estudo de sequências de ácidos nucleicos, em que três fases são necessárias e são repetidas inúmeras vezes. Assinale a alternativa que corresponde à terceira fase dessa metodologia molecular.

• A. A extensão, ou polimerização, envolve a ativação do Taq Polimerase seguida da síntese de novas cadeias.
• B. A desnaturalização, na qual ocorre o aumento da temperatura com a finalidade de romper as pontes de hidrogênio e, assim, permitir a abertura da dupla fita.
• C. O posicionamento, no qual são determinadas frações que são quantificadas por densitometria ou eluição, em que é gerado um gráfico de forma que as bandas podem ser comparadas, possibilitando qualquer sinal de desequilíbrio
• D. O anelamento, que realiza a ligação dos primes na região particular que se quer amplificar e é definido pela redução da temperatura.

Gabarito: A

Comentários

• 1- DESNATURAÇAO

  O DNA genômico contendo a sequência a ser amplificada é desnaturado por aquecimento a cerca de 95°C por cerca de 30 segundos. A dupla fita é aberta (desnaturada), tornando-se uma fita única.

   

  2- ANELAMENTO OU HIBRIDIZAÇÃO

  Após a separação das fitas, um par de iniciadores ou primers (uma fita de DNA específica para o gene que se quer estudar) complementam a fita oposta da sequência de DNA a ser amplificada. Ou seja, um deles é complementar à sequência em uma fita da dupla-hélice de DNA e o outro é complementar à sequência na outra fita. O molde é determinado pela posição dos iniciadores que se anelam a fita. Essa etapa ocorre a uma temperatura de 60°C.

  3- EXTENSÃO OU POLIMERIZAÇAO 

  Com o molde já identificado, a enzima DNA-polimerase adiciona as bases complementares, formando uma nova fita e então tem-se novamente a duplicação da fita de DNA. Esse processo acontece a uma temperatura de 72°C.