Questão 5637802

• Banca: UFRJ
• Órgão: UFRJ
• Ano: 2021
• Provas: UFRJ - 2021 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

Pichia pastoris é um fungo ascetomiceto utilizado para produção de proteínas heterólogas, como uma alternativa aos sistemas de expressão proteica em procariotos. Por ser um organismo metilotrófico, pode ser crescido utilizando o metanol como sua única fonte de carbono. Nesse contexto, assinale a alternativa correta.

• A. Uma das limitações da expressão de proteínas heterólogas em Pichia pastoris é a incapacidade dessa levedura de realizar modificações pós-traducionais, como formação de pontes de dissulfeto e glicosilações de aminoácidos em geral.
• B. Nessa levedura, a clonagem do gene de interesse ocorre pela integração de um cassete de expressão no genoma da levedura, via recombinação homóloga, podendo ser realizada por uma recombinase da própria levedura. 
• C. Ao contrário dos sistemas de expressão heteróloga em bactérias, a produção de proteínas heterólogas em Pichia pastoris pode ser realizada somente em pequena escala, já que o seu meio de cultura apresenta altas concentrações de metanol, que é altamente inflamável.
• D. Devido a sua parede celular espessa, a levedura Pichia pastoris não pode ser transformada pelo método de eletroporação, sendo mais utilizado o método de transformação por choque térmico.
• E. O uso de promotores induzidos por metanol para expressão do gene de interesse em Picchia pastoris não é recomendado, pois a presença de metanol no meio de cultura pode causar produção excessiva da proteína de interesse, levando a uma condição tóxica para a levedura.

Gabarito: B