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A questão
exige conhecimentos acerca da técnica de PCR e suas etapas, colocando-as na
ordem em que acontecem. Das fases citadas, o primeiro acontecimento é a
desnaturação do DNA genômico por 5 minutos (III), para que as fitas se separem.
Em seguida, acontece o anelamento dos iniciadores (ou primers) no DNA genômico,
o que dura cerca de 30 segundos (II). Depois do anelamento com os primers é
hora da extensão: a Taq polimerase age, sintetizando o DNA a partir da fita
molde, o tempo estimado é de 2 a 5 minutos (IV). Por último, temos a
desnaturação rápida (30 segundos) do DNA formado para servir de molde para o
próximo ciclo (I). Esse ciclo de três etapas (III-II-IV) se repete várias
vezes, aumentando assim o número de fragmentos de DNA de interesse.
Letra C
correta.
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Gab. C
O processo de PCR é utilizado para amplificar determinado trecho do DNA. Para esta construção é preciso alguns " assessórios" importantes como primers ( extensões de oligoncleotídeos, de sequência conhecida, para conjugar a determidada parte do DNA), solução tampão, TAQ polimerase ( enzima decontrole de temperatura).
Inicia a reação com a desnaturação da dupla fita de DNA ( 94°c) ; em seguida o anelamento dos primers com as fitas simples ( 30-60ºC, 30s); Síntese do DNA pela polimerase, promovendo a expansão do seguimento que se deseja (72ºC, 2-5 min); Desnaturação do DNA genômico para realização de um novo ciclo, que gira em torno de 30 a 40 vezes (94ºC, 30s).
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Gab. C
Ciclo da PCR:
- Desnaturação - 94ºC
- Anelamento (hibridação) - cerca de 50ºC (temperatura crítica), 30s
- Extensão - 72ºC (temperatura ótima da DNA polimerase), 2-5min
- Desnaturação para novo ciclo - 94ºC, 30s