Prova FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica

Questão 1698346

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Em última análise, as interações estabelecidas entre os aminoácidos componentes de uma dada cadeia polipetídica irão, em conjunto com outros fatores, definir a estrutura tridimensional que a cadeia irá assumir em solução. A determinação desta estrutura pode, em muitas das vezes, auxilar a compreensão do mecanismo de ação desta cadeia polipeptídica, e permitir o esclarecimento de suas funções em um determinado organismo que a produz. Assinale abaixo a afirmativa que não expressa uma estratégia experimental aplicável para a caracterização da estrutura tridimensional das cadeias polipeptídicas.

• A. Modelagem comparativa por homologia.
• B. Dicroismo circular.
• C. Método Ad initio. 
• D. Citometria de fluxo.
• E. Ressonância magnética nuclear.

Gabarito: D

Questão 1698349

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Assinale abaixo a alternativa que apresenta apenas exemplos de proteínas com estrutura quaternária.

• A. Colágeno e RNA polimerase II humana.
• B. Anticorpo anti-IgG humana e Ribonuclease A.
• C. Urease e Pepsina.
• D. Lisozima e Mioglobina.
• E. Tripsina e Hemoglobina.

Gabarito: A

Comentários

• Colágeno e RNA polimerase II humana

Questão 1698352

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

Os avanços das técnicas de biologia molecular, aplicados ao sequenciamento de genomas, vem disponibilizando nos bancos de dados, quase que dia a dia, milhares de novas sequencias proteicas. Um dos desafios da genômica funcional tem sido, portanto, o estudo e a cauterização da função destas novas sequências. O esclarecimento das redes de interação proteína-proteína que operam em determinadas situações é um dos grandes desafios impostos aos pesquisadores para melhor compreender os mecanismos que levam ao correto funcionamento dos organismos. Um dos métodos existentes para o estudo das interações proteína-proteína disponíveis atualmente é o sistema duplo-híbrido de leveduras. Como toda metodologia, esta apresenta uma série de vantagens e limitações. Com relação ao sistema duplo-híbrido, analise as afirmativas abaixo.

I. O Sistema duplo híbrido funciona apenas com proteínas solúveis.

II. Quando aplicada a um organismo eucarionte, a disponibilidade de uma boa biblioteca de cDNA do organismo em estudo é um fator crítico para o bom desempenho desta metodologia.

III. Interações que dependem de modificações pós-traducionais podem não ser detectadas nesta metodologia.

IV. Interações fracas, ou muito efêmeras, entre proteínas tendem a não serem detectadas com a utilização desta metodologia.

Assinale: 

• A. se todas as afirmativas estiverem corretas.
• B. se apenas as afirmativa I e III estiverem corretas.
• C. se apenas as afirmativas I, II, e III estiverem corretas.
• D. se apenas as afirmativas II, III e IV estiverem corretas.
• E. se apenas as afirmativas I, III e IV estiverem corretas.

Gabarito: D

Questão 1698355

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Com relação às técnicas de NMR e Cristalografia de raios X, assinale a alternativa correta.

• A. Na cristalografia de Raio X, não há limite para o tamanho das proteínas em estudo, desde que elas sejam cristalizadas.
• B. Para NMR, é necessário que a proteína em estudo esteja em solução e que esta não apresente um tamanho molecular muito superior a 30kDa.
• C. Apenas a técnica de NMR permite a análise de interações proteínas:proteínas ou proteínas:ligantes.
• D. Na NMR, a solubilidade da proteína é um parâmetro crítico.
• E. Durante a análise de Cristalografia de raio X, as amostras (cristais) podem sofrer danos em função da radiação aplicada, enquanto nas análises de NMR, as amostras não são danificadas durante o experimento.

Gabarito: C

Comentários

• Apenas a técnica de NMR permite a análise de interações proteínas:proteínas ou proteínas:ligantes.

Questão 1698358

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

É sabido que certos tipos de aminoácidos são facilitadores de certas estruturas secundárias, ao passo que outros, tendem a interromper ou desestabilizar outras estruturas. Assinale a alternativa abaixo onde são listados apenas aminoácidos quebradores de α-hélices.

• A. Prolina, Leucina e Metionina.
• B. Metionina, Leucina e Glutamanto.
• C. Valina, Prolina e Metionina.
• D. Prolina, Glutamato e Leucina.
• E. Valina, Serina e Asparagina.

Gabarito: E

Comentários

• Aminoácidos que quebram a alfa-hélice: A prolina quebra pois

  o seu grupo amino secundário não é compatível geometricamente com

  a espiral voltada para a direita da alfa-hélice. Diversos aminoácidos

  carregados também quebram a alfa-hélice pela formação de ligações

  iônicas ou por repulsão eletrostática entre um e outro. Os aminoácidos

  de cadeia laterais volumosas, como triptofano, ou aminoácidos como a

  valina ou a isoleucina, que se ramificam no carbono β, podem interferir

  com a formação de uma alfa-hélice se estiverem em grande número.

• Valina, Serina e Asparagina

Questão 1698361

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Assinale abaixo a alternativa que contém apenas estratégias experimentais que permitem o isolamento e a purificação de grandes complexos protéicos.

• A. Gel de eletroforese SDS-Poli-acrilamida e cromatografia líquida de alta pressão.
• B. Gradiente de ficoll e Cromatografia de tamanho de exclusão por gel filtração.
• C. Citometria de fluxo e eletroforese bi-dimensional.
• D. Cromatografia de afinidade e cromatografia de troca iônica.
• E. Coluna de gel filtração e Eletroforese de campo pulsado.

Gabarito: B

Questão 1698364

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Interessado no estudo da proteína P954, identificada em um complexo de alto peso molecular existente em uma bactéria termófila recentemente isolada, você foi encarregado de desenvolver uma metodologia capaz de purificar a proteína em questão. Também era importante que sua metodologia pudesse identificar outras proteínas que façam parte do mesmo complexo da P954. Com base nos seus conhecimentos sobre química de proteínas e sobre métodos de purificação, assinale a alternativa que descreve a sequência mais parcimoniosa de etapas que possa levar a indentificação dos componentes deste complexo protéico.

I. Eletroforese bidimensional.

II. Análise de massa em aparelho Q-TOF.

III. Cromatografia de tamanho de exclusão.

IV. Purificação em gradiente de sacarose.

V. Co-imunoprecipitação entre proteínas. 

• A. IV, I, III, II e V.
• B. IV, III, I, II e V.
• C. I, IV, III, II e V.
• D. IV, I, II, V e III.
• E. III, I, II, IV e V.

Gabarito: B

Questão 1698367

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

São exemplos de reagentes rotineiramente empregados na purificação e análise de proteínas e que resultam, de forma independente, na separação de complexos protéicos:

• A. ditiotreitol e sacarose.
• B. duodecil sulfato de sódio e amido.
• C. uréia e sulfato de amônio.
• D. β-mercaptoetanol e Ficoll.
• E. poliacrilamida e sacarose.

Gabarito: C

Comentários

• uréia e sulfato de amônio.

Questão 1698373

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Interessado na produção de uma proteína com atividade antiHIV, você foi encarregado de produzir esta proteína em grande quantidade em um sistema acoplado a uma unidade de produção industrial. Visando selecionar um sistema que rendesse o melhor aproveitamento comercial possível, você realizou uma série de testes bioquímicos na proteína em questão e derminou as características e os parâmetros de interesse descritos a seguir.

I. Massa molecular da proteína 45kDa.

II. Ponto isoelétrico 6,8.

III. Proteína solúvel em metanol.

IV. Proteína com 35% de resíduos de carbohidratos.

V. Proteína ativa apenas na forma fosforilada.

Com base nos resultados, selecione, dentre as alternativas abaixo, a que contém o sistema de expressão mais indicado para a produção de sua proteína, em escala industrial, e com baixo risco de biossegurança, para seu posterior uso no tratamento anti-HIV. 

• A. Fermentador bacteriano crescido a 37 °C.
• B. Bioreator contendo células de camundongos em cultura, crescidas a 37 °C.
• C. Fermentador de leveduras crescido a 28 °C.
• D. Bioreator contendo células humanas em cultura, crescidas a 37 °C. 
  
• E. Fermentador bacteriano crescido a 28 °C.

Gabarito: D

Comentários

• Bioreator contendo células humanas em cultura, crescidas a 37 °C.

Questão 1698376

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

Interessado no estudo funcional de uma proteína quinase receptora, você foi encarregado de preparar uma série de mutações pontuais que pudessem interferir com a atividade desta quinase e com isso contribuir para o esclarecimento de aspectos importantes de sua participação nos processos de transdução de sinal. Sabendo-se que a quinase em questão é do tipo treonina quinase, e que o sítio ativo dessa enzima contém um resíduo de Treonina (Thr418) que ativa a quinase quando sofre auto-fosforilação, assinale abaixo a sequência de mutantes que poderão produzir, respectivamente, uma quinase inativa e uma quinase constitutivamente ativa:

• A. mutação Thr418Gly e mutação Thr418Asp.
• B. mutação Thr418Asp e mutação Thr418Ala.
• C. mutação Thr418Ala e mutação Thr418His.
• D. mutação Thr418Lys e mutação Thr418Arg.
• E. mutação Thr418Gly e mutação Thr418Tyr.

Gabarito: A

Questão 1698379

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

Durante o ciclo de vida de uma célula eucarionte, seu material genético nuclear se estrutura na forma de cromossomas, que podem apresentar diferentes graus de condensação. Analisando o grau geral de compactação desta molécula ao longo do ciclo celular, podemos dizer que nas fases G1, S e Metáfase, respectivamente, o DNA se apresentará um grau de compactação:

• A. baixo, elevado e médio.
• B. alto, baixo e elevado.
• C. médio, baixo e elevado.
• D. baixo, elevado e médio.
• E. médio, elevado e elevado.

Gabarito: C

Questão 1698382

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

Os RNAs mensageiros eucariontes apresentam diferentes regiões, cada uma deles com funções específicas durante o tempo de vida desta molécula. Assinale a alternativa que contém as principais funções das regiões 5' e 3' de um RNA mensageiro:

• A. retirar dos íntrons e controlar o tempo de vida do RNA mensageiro na célula.
• B. mediar a afinidade do mRNA com a sub-unidade menor do ribossoma e controlar o tempo de vida do RNA mensageiro na célula.
• C. interagir com o RNA transportador e remover os íntrons.
• D. ligar a fatores de transcrição e controlar o movimento do RNA mensageiro do núcleo para o citoplasma.
• E. controlar o tempo de vida do RNA mensageiro na célula e interagir com a RNA Polimerase.

Gabarito: B

Questão 1698385

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

Assinale a alternativa que explica corretamente o que deve acontecer com uma região de cromatina condensada que tem suas moléculas de Histona H1 fosforiladas:

• A. aumentar seu grau de compactação, resultando em uma molécula de DNA mais exposta.
• B. aumentar o grau de compactação e ser reconhecida pelas enzimas que degradam o DNA.
• C. diminuir o grau de compactação, resultando numa maior exposição da molécula de DNA.
• D. marcar o DNA para que seja iniciado o processo de degradação.
• E. diminuir o grau de compactação, estando dessa forma a molécula de DNA menos exposta.

Gabarito: C

Questão 1698388

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

Trabalhando com o isolamento de um gene de humanos, um pesquisador desenvolveu duas estratégias de clonagem, utilizando como sonda um gene homólogo isolado de camundongos. Na primeira delas, ele utilizou como material inicial o DNA extraído de culturas de células de fibroblastos, resultando na obtenção do clone A. Na segunda abordagem, ele utilizou uma preparação de RNA mensageiro de células renais, resultando na obtenção do clone B. Considere ambas as estratégias bem sucedidas que possibilitaram a clonagem do mesmo gene.

 Experimento 1 – caracterização dos elementos que regulam a expressão tecidual do gene.

Experimento 2 – expressão do gene em bactérias para purificação da proteína codificada pelo gene isolado.

Experimento 3 – isolamento de genes de proteínas que interagem com a proteína codificada pelo gene isolado através do sistema Duplo Híbrido em leveduras.

Selecione o clone que deverá ser utilizado, respectivamente, para cada um dos experimentos listados acima.

• A. clone A, clone B e clone B.
• B. clone A, clone B e clone A.
• C. clone B, clone B e clone A.
• D. clone B, clone A, clone B.
• E. clone A, clone A e clone B.

Gabarito: A

Questão 1698394

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biologia
• Assuntos: Estrutura e fisiologia da Membrana Plasmática; Moléculas, células e tecidos

A interação de ligantes extracelulares com receptores presentes na membrana plasmática das células em geral levam a uma cascata de transdução de sinal que sinaliza, para o meio intracelular, as mudanças do meio extracelular, percebidas ao nível da membrana. Comumente, essa ligação leva a um aumento ou a um decréscimo temporário de moleculas intracelulares, denominadas mensageiros secundários. Assinale a alternativa abaixo que contém moléculas que podem ser considerados exemplos de mensageiros secundários.

• A. ATP e Ca+2.
• B. cAMP e Ca+2.
• C. cGMP e colesterol.
• D. Diacilglicerol e insulina.
• E. Inositol 1,4,5-trifosfato e hormônio esteróide.

Gabarito: B

Questão 1698400

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

A descoberta do processo de adição de resíduos de ubiquitina às proteínas representou um grande avanço no processo de reconhecimento de modificações pós-traducionais. Com relação a este processo, analise as afirmativas a seguir.

I. A adição de ubiquitina acontece sempre de forma específica, em determinados resíduos da cadeia polipeptídica.

II. A adição de ubiquitina acontece sempre de forma sequencial e rápida, de forma que são gerados sempre intermediários protéicos poli-ubiquitinados.

III. A adição de ubiquitina marca a proteína especificamente para a degradação via proteassoma.

IV. A adição de poli-ubiquitina corresponde a uma das formas de controle do tempo de via das proteínas celulares.

Assinale:  

• A. se todas as afirmativas estiverem corretas.
• B. se apenas as afirmativas II, III e IV estiverem corretas.
• C. se apenas as afirmativas II e III estiverem corretas.
• D. se apenas as afirmativas I, III e IV estiverem corretas.
• E. se apenas as afirmativas I e IV estiverem corretas.

Gabarito: E

Questão 1698403

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

A síntese de proteínas é um conjunto complexo de reações bioquímicas que garantem a produção de proteínas pela célula, a partir de um molde de RNA produzido a partir do genoma. Com relação à síntese de proteína, assinale a única afirmativa incorreta. 

• A. É um processo energeticamente dispendioso para a célula, consumindo grandes quantidades de moléculas de ATP e GTP.
• B. É um processo que ocorre no citoplasma da célula, ou associado a membranas do retículo endoplasmático ou do núcleo.
• C. Uma vez que existam mRNAs, t-RNAs ligados aos diferentes tipos de aminoácidos e RNAs ribossomais associados a proteínas, a síntese protéica é um processo de reações enzimáticas desempenhadas apenas por enzimas ou proteínas regulatórias. 
  
• D. É um processo que depende da estrutura tridimensional dos ribossomas e dos t-RNAs envolvidos no processo.
• E. É um processo que depende intrinsicamente da sequência molde definida no nível de DNA e que é repassada para a molécula de mRNA.

Gabarito: C

Questão 1698409

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Dentre os diferentes métodos de purificação de proteínas existentes, é correto afirmar que os métodos que se baseiam no peso molecular da proteína em questão para seu isolamento são:

• A. cromatografia de gel filtração e cromatografia de troca-iônica.
• B. cromatografia líquida de alta pressão e cromatografia de afinidade.
• C. cromatografia em papel e eletroforese não desnaturante em papel.
• D. eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida e eletrofocalização.
• E. cromatografia de gel filtração e eletroforese bidimensional.

Gabarito: E

Questão 1698412

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Interessado na purificação de uma proteína recém identificada em uma nova bactéria isolada de corais (proteína PX315), você foi encarregado de estabelecer um protocolo inicial de purificação da mesma, a partir de culturas in vitro estabelecidas em laboratório. A proteína PX315 apresenta peso molecular de cerca de 20kDa, um ponto isoelétrico de 8,1, e tem capacidade de interação com RNAs. Tendo em vista seus conhecimentos sobre os métodos de purificação de proteínas e os dados disponíveis para a proteína em questão, é correto afirmar que, a ordem dos passos sequenciais mais indicados para a purificação da mesma é:

• A. precipitação com sulfato de amônio, gel filtração, coluna de afinidade com poliribonucleotídeos.
• B. coluna de afinidade com desoxiribonucleotídeos, cromatografia líquida de alta pressão, gel filtração.
• C. gel filtração, cromatografia de fase reversa, cromatografia de afinidade com anticorpo anti-Proteína X
• D. precipitação com sulfato de amônio, cromatografia de afinidade com anticorpo anti-Proteína X, focalização isoelétrica.
• E. eletroforese bi-dimensional preparativa, coluna de afinidade com concanavalina A, precipitação com sulfato de amônio.

Gabarito: A

Questão 1698418

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Em relação aos métodos de purificação de proteínas, cromatografia de afinidade e cromatografia de troca iônica, assinale a alternativa que lista parâmetros que interferem em ambos os processos.

• A. temperatura da coluna, peso molecular das proteínas a serem separadas.
• B. carga elétrica, tamanho da coluna utilizada.
• C. tamanho da coluna e temperatura de eluição.
• D. pH do tampão de eluição e tempo de eluição.
• E. força iônica e pH do tampão de eluição.

Gabarito: E

Questão 1698424

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Métodos químicos como o tratamentos com ácido trifluorometanossulfônico, hidrazinólize, β-eliminação e oxidação por periodados são exemplos de técnicas comumente utilizadas em análises proteômicas que pretender caracterizar proteínas que foram modificadas pós-raducionalmente por:

• A. fosforilação.
• B. SUMOilação.
• C. glicosilação.
• D. ubiquitinação.
• E. miristoilação.

Gabarito: C

Questão 1698427

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Imunologia em Biomedicina; Técnicas Sorológicas e de Imunofluorescência

Com relação ao teste de ELISA, é correto afirmar que:

• A. É um método de detecção de vírus não sendo, portanto, aplicável na detecção de proteínas em geral.
• B. É um método de detecção fluorescente, sendo necessária a existência de um leitor de fluorescência de alta sensibilidade, sem o qual não é possível avaliar o nível de proteínas presentes na amostra.
• C. É um método que necessita obrigatoriamente da presença de um anticorpo de alta especificidade e alta afinidade pelo antígeno que está sendo detectado e que, desta forma, exige a existência de anticorpos monoclonais para o antígeno em questão.
• D. É um método de carácter qualitativo, sendo usado apenas para a detecção da presença ou da ausência de uma determinada proteína, mas que não pode ser aplicado em situações onde se quer detectar o nível absoluto de proteína.
• E. É um método que depende da conformação da proteína que se deseja quantificar e, assim, é sensível à variações de pH, temperatura e força iônica na amostra que esta sendo avaliada.

Gabarito: E

Comentários

• Porque a C está errada? Devido ou obrigatoriamente?

  Pois podem ser utilizados anticorpos monoclonais ou policlonais certo?

   

• Cassia, no ELISA não é obrigatório o uso de anticorpos monoclonais, é possível utilizar policlonais que não tem alta especificidade.

Questão 1698430

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Com relação aos métodos de coloração de proteínas em gel, assinale a alternativa correta.

• A. A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional, em função de seu alto grau de sensibilidade.
• B. A coloração por prata é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, em função de seu alto grau de sensibilidade.
• C. A coloração de Coomassie Blue é a mais indicada para análise de eletroforese bidimensional acoplada à espectrometria de massa, uma vez que as proteínas não se fixam de forma irreversível ao gel.
• D. A coloração por prata deve ser evitada quando a intenção é submeter as proteínas separadas eletroforeticamente à detecção por espectometria de massa em função do alto teor de spots falsos positivos detectados após o tratamento com nitrato de prata.
• E. A coloração por Coomassie Blue é a mais indicada apenas em situações onde a detecção das proteínas será realizada por meio da purificação e do sequenciamento manual dos spots de interesse, uma vez que, com esta técnica de coloração, são necessárias quantidades muito grandes de proteínas, o que inviabilizaria sua aplicação com métodos de detecção mais sensíveis.

Gabarito: C

Questão 1698433

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Com relação ao sequenciamento de peptídeos acoplado à análise proteômica, assinale a alternativa incorreta,

• A. Os melhores resultados de sequenciamento são obtidos com peptídeos de 2.5kDa ou menos.
• B. Para a realização do sequenciamento, as proteínas são retiradas do gel e submetidas à proteólise.
• C. Na espectometria de massa em tandem, os peptídeos são fragmentados nas ligações peptídicas.
• D. Alguns peptídeos geram informações para uma sequência completa, enquanto a maioria gera sequências parciais de 4 ou 5 aminoácidos.
• E. As pequenas sequências obtidas nas análises de sequenciamento são pouco informativas e apenas podem ser utilizadas se estiverem presentes de forma abundante na amostra, independente do fato de estarem ou não presentes no banco de dados utilizado.

Gabarito: E

Questão 1698436

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

O desenvolvimento das técnicas aplicadas à análise proteômica vem ampliando a resolução e o poder de detecção destas metodologias. Dentre estes avanços, o desenvolvimento de técnicas de coloração de proteínas por novas metodologias vem despertando grande interesse. Nesse sentido, analise as afirmativas a seguir.

I. A utilização de detecção por fluorescência aumenta o poder de resolução de proteínas em gel, mas é um método laborioso e que introduz a manipulação de reagentes perigosos, que aumentam o risco de exposição e biossegurança nos laboratórios e que detectam apenas uma fração das proteínas presentes nas amostras.

II. A utilização de marcação radioativa é relevante apenas quando estão sendo realizadas análises proteômicas baseadas em modificações pós-traducionais das proteínas.

III. As técnicas de marcação fluorescente e radioativa aumentam o poder de resolução das análises proteômicas, entretanto requerem etapas anteriores de incubação com compostos apropriados.

Assinale: 

• A. se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas.
• B. se apenas a afirmativa II estiver correta.
• C. se apenas a afirmativa I estiver correta.
• D. se apenas a afirmativa III estiver correta.
• E. se apenas as afirmativas II e III estiverem corretas.

Gabarito: D

Questão 1698439

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Com relação a aplicações e limitações da análise proteômica quantitativa, assinale a afirmativa incorreta.

• A. a detecção de fosfoproteínas e a comparação de sua distribuição entre duas situações experimentais constitui a base da análise fosfoproteômica.
• B. Dentre as modificações pós-traducionais de grande relevância biológica, as glicosilações são atualmente uma das grandes limitações da análise proteômica, uma vez que ainda não é possível a identificação destas modificações nestas abordagens.
• C. Experimentos que detectam a presença de proteínas modificadas por ubiquitinação ou SUMOilação podem ser acoplados à análise proteômica quantitativa de forma a gerar um painel de proteínas passíveis de sofrerem estas modificações.
• D. O isolamento de organelas e subsequente análise das proteínas presentes por meio de estratégias proteômicas, possibilita a realização de sub-proteomas celulares que permitem a identificação do conjunto de proteínas que compõem as distintas organelas. Esta caracterização possibilita ainda, com a aplicação de análises subsequentes, a determinação de sequências de direcionamento que operam no tráfego de proteínas nas células eucarióticas.
• E. Proteínas com baixa abundância relativa, proteínas de alto peso molecular e proteínas associadas a membranas apresentam o maior grau de dificuldade de detecção nas análises proteômicas.

Gabarito: B

Questão 1698442

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

A análise proteômica e a proteômica quantitativa são áreas da química de proteínas que vem se desenvolvendo com grande rapidez ao longo dos últimos anos. Sobre o tema, assinale a alternativa incorreta.

• A. Uma vantagem da análise proteômica sobre a análise da expressão gênica no nível de RNA é que a proteômica identifica produtos gênicos que são de fato expressos e não apenas mRNAs que podem não ser traduzidos.
• B. Uma das grandes limitações atuais da análise proteômica reside no número de proteínas que pode ser analisada em cada experimento, que sempre representará apenas uma fração das proteínas expressas em determinada situação.
• C. A análise proteômica é limitada a proteínas solúveis, não sendo aplicável a proteínas mais complexas como as proteínas de membrana.
• D. A análise proteômica permite a detecção de modificações pós-traducionais, o que amplia a relevância biológica dos dados obtidos.
• E. Um dos pré-requisitos básicos da proteômica é que o organismo analisado já tenha seu genoma sequenciado, ou pelo menos uma boa coleção de cDNAs esteja disponível.

Gabarito: C

Questão 1698445

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Sobre a realização de análises de proteômica quantitativa, assinale a alternativa correta.

• A. Proteínas, ou seus peptídeos, derivados de uma amostra experimental são marcados com um ou mais isótopos estáveis, misturados com uma amostra controle não marcada e em seguida digeridos proteoliticamente e analisados em espectrometria de massa.
• B. A diferença na assinatura de massas entre uma amostra marcada e não marcada servirá para identificar os polipeptídeos marcados de seus controles cognatos.
• C. A intensidade do sinal da espectrometria de massa das amostras de peptídeos diferencialmente marcados pode ser utilizada para determinar sua abundância relativa em cada uma das condições experimentais analisadas.
• D. São exemplos de métodos de marcação isotópica a marcação metabólica estável, a adição de massa ou de isótopos por meio de reações químicas e a introdução de isotópos estáveis por meio de reações enzimáticas.
• E. Uma grande limitação da proteômica quantitativa reside na impossibilidade de utilização de marcação multiplex, limitando as análises a um tipo de isótopo ou etiqueta molecular por vez, o que, por sua vez, limita a comparação a apenas duas condições experimentais.

Gabarito: E

Questão 1698448

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Com relação à espectrometria de massa, assinale a alternativa incorreta.

• A. A fragmentação dos peptídeos na célula de colisão ocorre de maneira imprevisível e aleatória, gerando em geral fragmentos de aminoácidos que não são utilizados para a identificação das proteínas.
• B. No analisador, os peptídeos são separados em função da razão massa/carga (m/z).
• C. Diferentes componentes do espectrômetro são mantidos a vácuo para evitar o movimento indesejado de íons.
• D. Um espectrômetro de massa contém três unidades básicas, uma fonte de ionização, um analisador e um detector.
• E. Na célula de colisão, os íons colidem com um gás (em geral He, Ar ou Ne), resultando na fragmentação do íon.

Gabarito: A

Comentários

• A colisão ocorre, de fato, aletoriamente, mas os fragmentos são sim utilizados para identificar as proteínas.

• C. Correta. Tanto os analisador quanto o detector são mantidos sob vácuo.

  D. Correta. Essa questão me deixou um pouco em dúvida, mas acredito que pode ser considerada como correta porque ele não restringiu só não mencionou os outros dois componentes básicos (Sistema de introdução de amostra e Sistema de Registro e Processamento de Dados)..

   

• Após digestão enzimática, os peptídeos são acelerados e ionizados, podendo ser detectados em função de sua razão massa/carga.

  Resposta incorreta: Letra A

Questão 1698451

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Nas análises rotineiras de eletroforese bidimensional, após a ruptura dos tecidos e/ou das células, as proteínas são solubilizadas e desnaturadas em soluções contendo detergentes não iônicos ou zwiteriônicos, agentes caotrópicos e pequenas quantidades de agentes redutores, para posterior análise em gel. Assinale abaixo a única alternativa que não descreve exemplos, respectivamente, destas três classes de substâncias.

• A. Triton-X100, tiouréia e β-mercaptoetanol.
• B. Duodecil sulfato de sódio, uréia e Ditiotreitol.
• C. Triton X-100, hidrocloreto de guanidina e Ditiotreitol.
• D. CHAPS (3-[(3-Cloroamidopropil)dimetilamônio]-1 propanosulfonato), uréia e iodoacetamida.
• E. sulfobetaínas, tiouréia e β-mercaptoetanol.

Gabarito: B

Questão 1698454

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Diferentes técnicas de detecção de proteínas através de métodos fluorescentes vem sendo desenvolvidas. Com relação a estas metodologias, analise as afirmativas a seguir.

I. A faixa de detecção linear dinâmica dos métodos de detecção de proteínas por fluorescência em eletroforeese em gel é normalmente superior aos métodos de coloração tradicional.

II. Corantes de proteínas por fluorescência do tipo SYPRO são fáceis de serem aplicados, por meio de uma única etapa de coloração de 30 a 60 minutos, sem a necessidade de descoloração.

III. Os corantes de flurorescência detectam em geral pequenas quantidades de proteínas (4-8ng) e existem metodologias para sua quantificação através de análises de imagens.

Com relação às afirmativas acima, assinale abaixo a alternativa correta.

Assinale:  

• A. se apenas a afirmativa I estiver correta.
• B. se apenas a afirmativa II estiver correta.
• C. se apenas a afirmativa III estiver correta.
• D. se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas.
• E. se todas as afirmativas estiverem corretas.

Gabarito: E

Questão 1698457

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Dentre adaptações e desenvolvimentos de tecnologias de análise proteômica, o estabelecimento de métodos de coloração de proteínas compatíveis com a análise por espectrometria de massa são de grande interesse. Dentre estes, encontram-se os métodos de coloração reversa. Com relação às vantagens de algumas destas metodologias, assinale a alternativa incorreta.

• A. Géis corados com zinco-imidazol podem ser eletrotransferidos ou eletroeluídos pela adição de um agente quelante ao tampão de transferência.
• B. O método de zinco-imidazol é compatível com métodos de microsequenciamento baseados no método de Edman.
• C. O método de zinco-imidazol é compatível com a digestão tríptica em gel para a identificação dos peptídeos por espectrometria de massa MALDI-TOF.
• D. O método de cloreto de potássio é mais sensível que os métodos de cloreto de cobre e zinco-imidazol.
• E. O método de cloreto de cobre é um pouco mais sensível que o Azul de Coomassie.

Gabarito: D

Questão 1698460

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Com relação às limitações da técnica de eletroforese bidimensional, assinale a alternativa incorreta.

• A. É impossível se analisar todas as proteínas de uma amostra biológica em um único gel, devida a tremenda variação em abundância das proteínas.
• B. Caso seja aumentada a quantidade proteínas visando a detecção de proteínas menos abundantes, o gel é sobrecarregado pelas proteínas de maior abundância e a resolução é perdida.
• C. É necessário encontrar uma estratégia de solubilização e separação que atenda a todas as proteínas de uma amostra.
• D. Proteínas de alto peso molecular (maiores que 200kDa) podem não migrar eficientemente no gel.
• E. Proteínas muito pequenas (menores que 10kDa) se sobrepõem, devido a sua alta mobilidade no gel da primeira dimensão, o que resulta em perda de resolução.

Gabarito: E

Comentários

• A resolução do gel fica comprometida para proteínas com pesos moleculares extremos, baixos e altos. Quanto à sobreposição, o risco é para as proteínas maiores, com menor mobilidade no gel.

Questão 1698463

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Com relação à fragmentação e ao sequenciamento de peptídeos utilizados nas análises de espectroscopia de massa, assinale a alternativa incorreta.

• A. Os aminoácidos Glutamina e Histidina apresentam massas próximas e não são distinguíveis em equipamentos com baixa exatidão de massa, tais como os triplo quadrupolos e ion traps.
• B. Para se verificar se a Serina constituinte de um determinado peptídeo apresenta uma fosforilação, deve-se verificar se há um pico com massa 98 u inferior ao íon correspondente (-b ou -y).
• C. Modificações pós-traducionais ocorridas nas cadeias laterais de certos aminoácidos, tais como fosforilações em resíduos de Serina e Treonina, glicosilações ou oxidação em Metionina tornam tais grupos laterais lábeis, de modo que a perda neutra destes íons pode ser observada.
• D. Arginina, Lisina, Glutamina e Asparagina são exemplos de aminoácidos que apresentam pronunciada perda neutra de NH₃.
• E. Serina, Treonina e Ácido Glutâmico são aminoácidos que, quando presentes em peptídeos submetidos a fragmentação por dissociação induzida por colisão (CID), apresentarão perda neutra de H₂O bastante pronunciada.

Gabarito: A

Questão 1698466

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

O método de Edman tem sido um dos mais utilizados para o sequenciamento de peptídeos e compreende uma série de ciclos de reação. Analise as afirmativas abaixo com relação à este método.

I. Na primeira etapa, o polipeptídeo em estudo reage com PITC, que se acopla ao grupo NH2 livre do aminoácido 1.

II. Na segunda etapa, ocorre a hidrólise ácida da proteína conjugada com PITC, que libera a feniltiohidantoína (PTH) do aminoácido 1 e o restante do polipeptídeo, tornando o aminoácido 2 o novo resíduo N-terminal.

III. Na terceira etapa, a análise cromatográfica do PTHaminoácido é realizada.

Assinale: 

• A. se apenas a afirmativa I estiver correta.
• B. se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas.
• C. se todas afirmativas estiverem corretas.
• D. se apenas a afirmativa II estiver correta.
• E. se apenas as afirmativas II e III estiverem corretas.

Gabarito: C

Questão 1698469

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Dentre as diferentes estratégias disponíveis para análise proteômica, uma das mais utilizadas tem sido a técnica de MALDI-TOF. Obseve as afirmativas realizadas com relação a esta tecnologia e assinale a alternativa incorreta.

• A. Na análise MALDI, o laser é utilizado para irradiar amostras biológicas em associação com compostos químicos (matriz), os quais permitem a absorção da energia, com consequente ionização dos peptídeos.
• B. Uma vez ionizados, os peptídeos seguem para o analizador TOF (time of flight). Os íons gerados são então separados em um tubo de vácuo, em razão da relação m/z que apresentam.
• C. Os íons de menor relação m/z são os primeiros a chegar ao detector.
• D. No modo linear de operação de um espectrômetro MALDI-TOF, os íons gerados percorrem uma trajetória linear e os íons chegam ao detector presente no final do tubo, o que resulta em uma melhora na resolução e auxilia na análise de diferentes íons com a mesma relação m/z.
• E. No modo de operação reflectron de um equipamento MALDI-TOF, a trajetória dos íons é alterada por um espelho disposto no final do tubo, sendo então enviados a outro detector.

Gabarito: D

Questão 1698472

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Nos experimentos de análise proteômica, comumente são utilizados, sequencialmente, uma fonte de ionização de peptídeos seguida de um analisador de massa. Assinale a alternativa que apresenta exemplos dos dois tipos de aparelhos.

• A. MALDI e eletrospray.
• B. Q-TOF e TOF-TOF.
• C. IonTrap e Q-TOF.
• D. MALDI e TOF.
• E. Q-TOF e TOF.

Gabarito: D

Comentários

• MALDI – ionização por dessorção a laser com auxílio de matriz

  TOF (Tempo de voo) - analisador de massas. Princípio da análise: íons com energia cinética iguais entram em um tubo onde se movem livremente; A velocidade e, assim, o tempo de chegada ao detector dependem da massa

Questão 1698475

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Biologia Molecular em Biomedicina

Após a descoberta de um novo tipo de bactéria, isolada em amostras de solo da região amazônica, um grupo de pesquisa iniciou dois projetos multidisciplinares estruturados em rede. No primeiro dos projetos, foi realizado o sequenciamento completo e a anotação do genoma desta nova bactéria. No segundo projeto, foi realizada a análise proteômica da mesma bactéria. Após a finalização dos projetos, os resultados obtidos foram comparados. Com relação a esta comparação, assinale a alternativa correta.

• A. O número de polipeptídeos identificados na análise proteômica será maior que o número de genes identificados no genoma em função dos processos de modificação do transcrito primário que ocorrem antes da tradução.
• B. O número de polipeptídeos identificados no proteoma será menor do que os do genoma uma vez que neste organismo não existem genes repetitivos.
• C. Será observado um menor número que polipeptídeos em função da formação de complexos protéicos formados por diferentes sub-unidades.
• D. O proteoma será variável e pode ser maior ou menor do que o genoma, em função das necessidades da célula no momento da análise.
• E. Serão identificados mais genes do que polipeptídeos, uma vez que não existe splicing alternativo e existirão sempre genes para rRNAs e tRNAs.

Gabarito: E

Questão 1698478

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

A abordagem proteômica tem possibilitado a caracterização de grandes quantidades de proteínas que estão presentes em condições fisiológicas definidas. Dentre as diferentes estratégias experimentais utilizadas, a proteômica de organelas foi uma das primeiras abordagens que disponibilizaram importantes conjuntos de dados, criando a expectativa de que o conjunto completo de proteínas que compõe as diferentes organelas de uma célula eucarionte pudesse ser caracterizado. Entretanto, análises realizadas com proteomas de cloroplastos e mitocôndrias têm demonstrado que, apesar dos grandes avanços alcançados, ainda não é possível a identificação de todas as proteínas que compõem estas organelas. Sobre tais iniciativas, analise as afirmativas a seguir.

I. A análise do proteoma de uma organela é limitada em função da perda de proteínas durante o processo de preparação das amostras.

II. O alto grau de conservação entre proteínas presentes em cloroplastos e mitocôndrias, assim como sua conservação com proteínas presentes em outros compartimentos celulares, dificulta a identificação das mesmas nos proteomas organelares.

III. Proteínas de membrana estão sempre representadas em baixa proporção, o que limita a identificação destas na abordagem proteômica.

IV. Proteínas destas organelas sofrem proteólise durante seu processo de importação para as organelas, o que limita sua identificação final.

Assinale: 

• A. se todas as afirmativas estiverem corretas.
• B. se apenas as afirmativas II e III estiverem corretas.
• C. se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas.
• D. se apenas as afirmativas I, III e IV estiverem corretas.
• E. se apenas as afirmativas II, III e IV estiverem corretas.

Gabarito: C

Questão 1698481

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina; Métodos Analíticos: Fotometria, Colorimetria, Espectrofotometria, Turbidimetria, Nefelometria, Eletroforese de Hemoglobinas e Proteínas, Cromatografia

Sobre resolução espectrométrica dos aparelhos de determinação de massas, analise as afirmativas a seguir.

I. A largura do pico detectado (avaliada na sua base), dividida pela massa do pico, define a resolução espectrométrica de um aparelho de determinação de massa.

II. A introdução do sistema Orbitrap aumentou bastante a resolução espectrométrica em relação aos sistemas IonTraps simples, anteriormente utilizados.

III. Quanto maior a resolução espectrométrica, maior a chance de mais de um peptídeo serem agrupados em um mesmo pico.

IV. Uma alta resolução espectrométrica é uma pré-condição para a identificação e quantificação acurada dos peptídeos.

Assinale: 

• A. se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas.
• B. se apenas as afirmativas II e IV estiverem corretas
• C. se apenas as afirmativas I, II e IV estiverem corretas.
• D. se apenas as afirmativas II, III e IV estiverem corretas.
• E. se todas as afirmativas estiverem corretas.

Gabarito: B

Comentários

• resolução é calculada duas vezes a distância entre os pontos médios dos picos dividido pelo somatório da largura das suas respectivas bases.

Questão 1698484

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Com o objetivo de avaliar o conjunto completo de proteínas presentes nos cloroplastos de uma célula vegetal, um laboratório de biologia molecular contratou os serviços de um laboratório especializado em análise proteômica quantitativa. Durante as negociações para a realização do projeto, foram apresentadas algumas estratégias alternativas de abordagem experimental.

I. Análise proteômica global de cloroplastos isolados a partir de gradientes de densidade.

II. Análise do proteoma da membrana externa cloroplastidial, utilizando frações de membrana externa isolada a partir de extratos purificados obtidos de cloroplastos purificados em gradiente de densidade.

III. Análise proteômica da fração solúvel de cloroplastos isolados em gradiente de densidade.

IV. Análise do proteoma da membrana interna cloroplastidial, utilizando frações de membrana externa isolada a partir de extratos purificados obtidos de cloroplastos purificados em gradiente de densidade.

V. Análise do proteoma da membrana tilacóide, utilizando frações de membrana tilacóide isolada a partir de extratos purificados obtidos de cloroplastos purificados em gradiente de densidade.

Tendo em vista o custo das análises e o tempo necessário para sua realização, o laboratório só poderia realizar duas destas estratégias. Visando obter a maior quantidade de dados relacionados à composição dos cloroplastos desta espécie, assinale a alternativa que melhor descreve as abordagens que deveriam ser realizadas prioritariamente.

Assinale:

• A. se apenas as afirmativas I e V estiverem corretas.
• B. se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas.
• C. se apenas as afirmativas II e III estiverem corretas.
• D. se apenas as afirmativas II e V estiverem corretas.
• E. se apenas as afirmativas II e IV estiverem corretas.

Gabarito: A

Questão 1698487

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Analise as afirmativas abaixo com relação aos diferentes tipo de analisadores de massa.

I. Em um equipamento Q-TOF, um filtro de massa quádruplo está acoplado a uma analisador de tempo de vôo que diferencia as moléculas presentes em função do tempo de sua chegada ao detector.

II. Após a ionização por eletrospray, a relação massa/carga das moléculas é determinada por meio de sua trajetória em um campo elétrico estático ou dinâmico.

III. No sistema IonTrap, os íons são capturados em um campo onde eles podem ser acumulados e manipulados em análises subsequentes.

IV. No sistema Orbitrap, os íons circulam ao redor de um eletrodo central com formato fusiforme. A frequência de oscilações dos íons nesta trajetória é proporcional à raiz quadrada da razão m/z.

Assinale: 

• A. se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas.
• B. se apenas as afirmativas II, III e IV estiverem corretas.
• C. se apenas as afirmativas I, II e IV estiverem corretas.
• D. se apenas as afirmativas II e IV estiverem corretas.
• E. se todas as afirmativas estiverem corretas.

Gabarito: E

Questão 1698490

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Analise as afirmativas abaixo.

I. Na ionização por eletrospray, os peptídeos a serem analisados são dissolvidos em um líquido que passa por uma agulha, a um alto potencial elétrico. A voltagem aplicada dispersa o líquido em pequenas gotículas, altamente carregadas, que evaporam e transferem as moléculas para o vácuo de um espectrômetro de massas.

II. O aparelho Ion Trap-Orbitrap é um espectrômetro de massa híbrido, que combina um Ion Trap linear com um analisador Orbitrap. O Orbitrap é um tipo de analisador de massa de Ion Trap que utiliza transformada de Fourier, no qual os íons oscilam ao longo e ao redor de um cilindro central.

III. A dissociação induzida por colisão (CID) consiste na fragmentação de íons peptídicos pela energia adquirida durante a colisão com um gás quimicamente reativo.

IV. A marcação isotópica estável por aminoácidos em culturas de células (SILAC) é um dos tipos de marcação metabólica utilizada na proteômica quantitativa. Comumente, formas dos aminoácidos lisina e arginina, marcados com ³³P e ³⁵S, são incorporados em uma cultura celular ou em organismo através da marcação metabólica. Na análise por espectrometria de massa, os aminoácidos marcados com esses isótopos pesados são distinguíveis dos seus correlatos não marcados por uma mudança de massa característica.

Assinale: 

• A. se todas as afirmativas estiverem corretas.
• B. se apenas as afirmativas I, II, e III estiverem corretas.
• C. se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas.
• D. se apenas as afirmativas II, III e IV estiverem corretas.
• E. se apenas as afirmativas I, II e IV estiverem corretas.

Gabarito: C

Comentários

• c) A dissociação induzida por colisão (CID) consiste na fragmentação de íons peptídicos pela energia adquirida durante a colisão com um gás quimicamente reativo. o gás é inerte (He ou Ar)

Questão 1698493

• Banca: FGV
• Órgão: FIOCRUZ
• Ano: 2010
• Provas: FGV - 2010 - FIOCRUZ - Tecnologista em Saúde - Proteômica
• Disciplina: Biomedicina - Análises Clínicas
• Assuntos: Bioquímica em Biomedicina

Diferentes métodos de detecção de proteínas vem sendo desenvolvidos e adaptados visando o aprimoramento, a modernização e a simplificação do processo de detecção de proteínas. No desenvolvimento e na adaptação de um novo método para análise proteômica, assinale a alternativa incorreta é incorreto afirmar que são características desejáveis:

• A. maior sensibilidade e capacidade de automação.
• B. especificidade e utilização de grande número de reagentes.
• C. detecção simultânea de mais de um tipo de macromolécula e baixo custo.
• D. sensibilidade e especificidade.
• E. capacidade de automação e aplicabilidade direta de análise por espectrometria de massa.

Gabarito: C