- ID
- 1703983
- Banca
- FGV
- Órgão
- FIOCRUZ
- Ano
- 2010
- Provas
- Disciplina
- Técnicas em Laboratório
- Assuntos
Sobre o conjunto de normas, procedimentos e atitudes de segurança que visam minimizar os acidentes em laboratório, analise as afirmativas abaixo.
Sobre o conjunto de normas, procedimentos e atitudes de segurança que visam minimizar os acidentes em laboratório, analise as afirmativas abaixo.
Sobre, o descarte dos resíduos do grupo E, que são constituídos por materiais perfurocortantes como objetos e instrumentos contendo cantos, bordas, pontos ou protuberâncias rígidas e agudas capazes de cortar ou perfurar, conforme a Resolução Agência Nacional de Vigilância Sanitária/ANVISA, assinale a alternativa correta.
Uma solução hipertônica contém:
Em relação aos equipamentos de proteção individual (EPI), pode-se afirmar que sua utilização é necessária:
Nas células eucarióticas, as proteínas que são destinadas à exportação são sintetizadas no:
O ciclo celular das células eucarióticas é dividido nas fases G1, S, G2 e M. Sobre a caracterização destas fases, assinale a alternativa correta.
Diversos princípios governam a difusão das moléculas através de bicamadas lipídicas. Sobre a velocidade de difusão, assinale a alternativa que ordena da difusão mais rápida para a mais lenta.
Sobre as classificações de resíduos químicos e as normas de descarte associadas, assinale a afirmativa incorreta.
Sobre o consentimento informado, analise as afirmativas a
seguir.
I. O consentimento é composto por três elementos básicos:
capacidade, informação e benefício.
II. O consentimento informado para fins de pesquisa deve
abranger, entre outros: informação sobre o objetivo da
pesquisa; riscos e desconfortos potenciais; benefícios;
confidencialidade; compensação, se houver, do
tratamento, caso ocorram danos; voluntariedade na
aceitação e possibilidade de abandono sem restrições ou
consequências.
III. O consentimento informado é uma mera formalidade
prevista nos projetos de pesquisa que envolvam seres
humanos, e mesmo quando não compreendido pelo
indivíduo, o executor do projeto pode convencer o
mesmo a assinar tal consentimento em benefício da
pesquisa.
Assinale:
Sobre a criação de plataformas tecnológicas multi usuários, assinale a alternativa incorreta.
A implantação de um programa de gerenciamento e de descarte de resíduos em um laboratório multiusuário é de extrema importância. Sobre a atitude para o estabelecimento desse programa, assinale a alternativa incorreta.
Assinale a alternativa que explicita um item que não é necessário incluir nos procedimentos operacionais padrões (POPs).
Com relação aos procedimentos de biossegurança, analise
as afirmativas a seguir.
I. As capelas de exaustão devem ser utilizadas sempre que
os experimentos envolvam reagentes com potencial de
explosão ou que produzam gases tóxicos e nocivos. Para
garantir o funcionamento correto das capelas de
exaustão, solte dentro da capela uma folha de papel
absorvente ou qualquer papel fino o bastante e observe
se esta folha é empurrada pelo fluxo de ar em direção à
superfície do capela.
II. Nunca se aproxime de fontes de laser sem utilizar óculos
de proteção e nunca deixe materiais reflexivos próximos a
estas fontes de laser.
III. Nunca toque a superfície de lâmpadas de mercúrio
utilizadas em microscópios ou outros aparelhos sem
luvas de proteção, pois além destas lâmpadas se
aquecerem após o uso, a manipulação sem luvas pode
levar à contaminação e ao dano.
Assinale:
Sobre as cabines de segurança biológica (CSB), assinale a alternativa incorreta.
Sobre o descarte de resíduos em um laboratório analise as
afirmativas a seguir.
I. Resíduos infectantes devem ser autoclavados antes do
descarte para os ambientes externos ao laboratório.
II. Resíduos radioativos, com atividade superior às
recomendadas pela Comissão Nacional de Energia
Nuclear (CNEN), deverão ser acondicionados em
depósitos de decaimento (até que suas atividades se
encontrem dentro do limite permitido para sua
eliminação). Os rejeitos radioativos líquidos e sólidos
devem ser acondicionados em um único recipiente e
descartados seguindo as normas de descarte.
III. Os resíduos químicos apresentam riscos potenciais de
acidentes inerentes às suas propriedades específicas. Os
resíduos químicos devem ser tratados antes do descarte.
No armazenamento de resíduos químicos, devem ser
considerados a compatibilidade dos produtos envolvidos,
a natureza do mesmo e o volume.
Assinale:
Sobre o descarte de resíduos em um laboratório, analise as
afirmativas a seguir.
I. Os resíduos infectantes compostos por culturas ou
estoques de microrganismos provenientes de laboratórios
clínicos ou de pesquisa, meios de cultura, placas de Petri,
instrumentos usados para manipular, misturar ou inocular
microrganismos, devem ser embalados em sacos
plásticos para o lixo tipo 1, indicados pela ABNT e
autoclavados antes de serem descartados.
II. Para esterilização de vidraria contaminada ou suja com
material proteico, esta deve ser imersa em solução de
hipoclorito de sódio a 1% em vasilhames apropriados por,
no mínimo, 12 horas.
III. A esterilização de vidrarias utilizadas com água ou
soluções tampão sem proteínas deve ser feita através da
lavagem em água corrente e, em seguida, três vezes em
água destilada, colocados para secar deixando-os
emborcados sobre papel toalha.
Assinale:
Com relação a classificação dos níveis de biossegurança
segunda as nornas da ANVISA, analise as afirmativas a
seguir
I. Nos laboratórios classificados como nível biológico
classe 3 é permitida a manipulação de agentes nativos ou
exóticos que potencialmente podem ser transmissíveis
por vias respiratórias e que podem causar infecções
sérias e potencialmente fatais. Mycobacterium
tuberculosis e o vírus da encefalite de St. Louis são
exemplos de patógenos permitidos neste nível de
biossegurança.
II. O nível biológico classe 1 representa um nível básico de
contenção que utiliza práticas padrões de microbiologia
sem a necessidade de barreiras primárias ou
secundárias, com exceção de uma pia para higienização
das mãos. Cepas definidas e microorganismos
conhecidos por não causarem nenhuma patogenia a
pessoas sadias são manipulados neste nível.
III. No nível biológico classe 2 as barreiras primárias e
secundárias devem existir. Vírus da Hepatite B, HIV,
Hantavírus e salmonela são exemplos de microrganismos
permitidos para a manipulação em laboratórios classe 2.
Assinale:
Analise as afirmativas a seguir.
I. A tendência de um aminoácido livre que possua uma
cadeia lateral como –COOH liberar um próton (pK) é a
mesma se este aminoácido estiver em solução ou fizer
parte de uma cadeia polipeptídica em uma proteína.
II. Modificações pós traducionais tais como fosforilação,
acetilação, ubiquitinação e sumolução podem regular a
atividade e a degradação das proteínas.
III. Em um organismo, cujo genoma já tenha sido
sequenciado e disponível para consulta, podemos
identificar um gene mutante responsável por um fenótipo
específico através de mutações induzidas por agentes
mutagênicos ou por mutações inseridas através de
mutagênese.
Assinale:
Os critérios de risco primário usados para a definição dos níveis de contenção em laboratórios biológicos (referidos como níveis de segurança biológica) são:
Os microorganismos que devem ser manipulados em
Laboratório NB3 incluem:
I. Vírus da Febre Amarela selvagem, Bacillus anthracis e
Chlamydia psittaci.
II. Helicobacter pylori, Vírus da Hepatite C e Chlamydia
pneumoniae.
III. Vírus Marburg, Mycobacterium leprae e Vírus Rocio.
Assinale:
Em geral, o momento mais indicado para a realização do subcultivo das linhagens celulares derivadas de mamíferos é:
No nível de contenção biológica 3 (BSL-3), as práticas microbiológicas, os equipamentos de segurança e as instalações de proteção são apropriados para:
Sobre a obtenção de culturas primárias de linfócitos e macrófagos
a partir do sangue periférico, analise as afirmativas a seguir.
I. O sangue periférico deve ser coletado na presença de um
anti-coagulante.
II. O sangue periférico deve ser misturado com volumes
iguais de solução salina ou PBS e adicionado
cuidadosamente no topo de algum tipo de composto que
agrega eritrócitos (polímeros de polissacarídeos) e
aumenta a taxa de sedimentação destas células. Assim
sendo, os eritrócitos serão sedimentados após
centrifugação enquanto os leucócitos poderão ser
coletados a partir do sobrenadante.
III. Após a obtenção dos leucócitos, estes devem ser
inoculados em placas de plástico contendo meio nutritivo
rico por um período de 30 minutos a duas horas a uma
temperatura de 37°C. Após este período, os monócitos
estarão aderidos ao suporte plástico e os linfócitos
estarão soltos no sobrenadante, estes últimos são
transferidos para outro frasco de cultivo, enquanto os
monócitos serão cultivados por no mínimo sete dias para
sua diferenciação em macrófagos.
Assinale:
Sobre o conceito de esterilização, analise as afirmativas a seguir.
I. A eliminação total ou parcial de microorganismos em material
e soluções que entrarão em contato com culturas celulares.
II. A eliminação de bactérias, fungos, vírus e esporos, em material
e soluções que entrarão em contato com culturas celulares.
III. A limpeza de objetos e equipamentos, utilizados durante
a experimentação com culturas de células, com solução
desinfetante de etanol a 70%.
Assinale:
Sobre o procedimento de cultivo das linhagens celulares que crescem em suspensão, assinale a alternativa incorreta.
O crescimento de células de origem animal em um meio nutricional completo é usualmente ótimo quando o meio é tamponado em uma faixa de pH entre 7,2 a 7,4. Vários tampões podem ser utilizados para este fim, sendo que os que funcionarão de forma mais eficiente são aqueles cujo pKa está o mais próximo possível da faixa de pH requerida. Dentre os tampões descritos abaixo que podem ser comumente utilizados em cultivo de células animais, assinale aquele em que um dos componentes do sistema de tamponamento está em fase gasosa.
Assinale a alternativa incorreta.
Os agentes físicos geralmente utilizados para a esterilização de objetos impermeáveis ao vapor e de soluções contendo moléculas termossensíveis são, respectivamente,:
O subcultivo da maioria das células aderentes envolve a
utilização da protease tripsina e do sal EDTA. Sobre o motivo
da utilização destes reagentes no procedimento de
subcultivo celular, analise as afirmativas a seguir.
I. As células aderem à superfície inferior da garrafa de
cultivo e umas as outras pelas proteínas que compõe a
matriz extracelular. Enquanto a tripsina reconhece e cliva
regiões nativas destas proteínas, a função do EDTA é
quelar os íons Ca2+, que são requeridos para a ligação
célula-célula mediada pelas caderinas. Desta forma, tanto
o EDTA quanto a tripsina servirão para promover o
destacamento das células do frasco de cultivo e sua
separação.
II. As células são cultivadas geralmente na presença de soro
que fornece fatores de crescimento necessários para a
divisão celular. A fim de realizar o subcultivo é necessário
eliminar o soro presente no meio. A tripsina irá clivar as
proteínas do soro e o EDTA facilitará a formação de
agregados protéicos que serão facilmente removidos ao
se descartar este meio, promovendo assim a retirada do
soro do meio de cultivo.
III. As células aderem à superfície inferior da garrafa de
cultivo e umas as outras através das proteínas que
compõe a matriz extracelular. A tripsina reconhece e cliva
regiões nativas destas proteínas e a função do EDTA é
servir de co-fator para a tripsina aumentando sua
atividade. Desta forma, promovendo o destacamento das
células do frasco de cultivo e sua separação.
Assinale:
Você precisa preparar uma solução na concentracão de 0,25mM de um iniciador (primer) que está liofilizado. A única informação disponível é que no tubo existem 25nMoles deste iniciador. O volume de água que deve ser adicionado a este tubo para se obter esta solução a 0,25mM é:
A fim de garantir a homogeneidade e a reprodutibilidade da experimentação envolvendo culturas celulares, é necessário que, antes da utilização de células para montagem de experimentos, seja realizada a contagem das mesmas. Todas as afirmativas abaixo se relacionam ao procedimento correto de contagem e ao cálculo do número de células em uma suspensão, exceto uma. Assinale-a.
Assinale a alternativa correta.
Analise as afirmativas abaixo em relação às características
das culturas primárias e linhagens permanentes.
I. Culturas primárias podem permanecer em divisão por um
longo tempo, porém o número de divisões é sempre
finito.
II. A obtenção de uma linhagem permanente pode
acontecer a partir de uma modificação que aconteça
aleatoriamente em uma ou poucas células presentes em
uma cultura, dando-lhe(s) a característica de proliferação
indefinida. Alternativamente, esta característica pode ser
obtida a partir da transformação das células primárias por
exemplo por infecção por vírus carcinogênico.
III. As culturas primárias normais sempre darão origem
naturalmente à linhagens celulares permanentes ou
contínuas.
Assinale:
Leia atentamente as afirmativas abaixo sobre o procedimento
de autoclavação:
I. Durante a autoclavação é a temperatura elevada, e não a
pressão, que promove a morte dos microorganismos.
II. O tempo necessário para a esterilização, por
autoclavação, de qualquer material ou solução irá variar,
dependendo do tipo de material a ser autoclavado, assim
como da condição do mesmo.
III. As garrafas ou frascos, vazios ou contendo líquido em
seu interior (meios, soluções, água), devem ser
autoclavados com a tampa levemente aberta, pois este
procedimento garante que o vapor quente chegue de
forma homogênea ao interior do recipiente.
Assinale:
Assinale a afirmativa incorreta:
Sobre as boas práticas laboratoriais relacionadas à rotina de
diagnóstico molecular por PCR, analise as afirmativas a
seguir.
I. A única área que deve ser separada fisicamente das
demais, no laboratório que realiza diagnóstico molecular
por PCR, é a área onde é realizada a extração de ácidos
nucléicos a partir das amostras clínicas.
II. O fluxo de trabalho, no laboratório que realiza diagnóstico
molecular por PCR, deve ser sempre a partir da área livre
de DNA para a área onde os tubos das reações finais de
PCR são abertos ou manipulados (área que contem
amplicons).
III. Para a pipetagem das misturas de PCR, diluição de
oligonucleotídeos, etc, não é necessária a utilização de
ponteiras com barreira.
Assinale:
Sobre a técnica de ELISA, assinale a alternativa incorreta:
Os seguintes componentes essenciais são requeridos em uma reação de PCR, exceto:
Um pesquisador desenvolveu um teste ELISA para a
detecção de anticorpos anti-HIV a fim de ser utilizado como
teste diagnóstico para esta infecção. Com o intuito de
verificar a sensibilidade e a especificidade de seu novo teste,
o pesquisador utilizou um banco de soros sabidamente
positivos para a presença de anticorpos anti-HIV (1.000
soros) e um banco de soros sabidamente negativos para a
presença de anticorpos anti-HIV (1.000 soros). Seus
resultados foram: dos 1000 soros positivos seu teste
detectou 920 positivos; dos 1000 soros negativos seu teste
detectou 1 positivo. Sobre esses resultados, analise as
afirmativas abaixo.
I. Pode-se dizer que com este novo teste houve um número
de 80 resultados falso-positivos e um resultado falso-negativo.
II. Define-se sensibilidade como a percentagem dos
resultados que serão negativos quando o anticorpo
testado não estiver presente.
III. Um ensaio pouco sensível significa que haverá a
detecção de um grande número de falso-negativos.
Assinale:
Em relação aos métodos sorológicos de diagnóstico, assinale a alternativa incorreta.
Assinale a alternativa incorreta.
O estabelecimento de uma reação de PCR para o
diagnóstico molecular de agentes infecciosos a partir de
amostras biológicas muitas vezes apresenta como maior
dificuldade a amplificação específica do fragmento genômico
do patógeno de interesse. As afirmativas a seguir enumeram
possibilidades para aumentar a especificidade da reação.
I. Aumento da concentração de deoxinucleotídeo na reação
de PCR.
II. Aumento da concentração da DNA polimerase na reação
de PCR.
III. Realização de reações de PCR aninhadas (PCR-nested),
utilizando par de iniciadores mais externos à região de
interesse na primeira reação, seguido da utilização de par
de iniciadores mais internos.
Assinale:
Para a realização de PCR diagnóstico, utiliza-se
frequentemente iniciadores degenerados ou contendo
inosina como base nitrogenada a fim de maximizar a chance
de detecção em amostras clínicas do ácido nucléico de
patógenos que apresentem alta taxa de polimorfismos. Sobre
o tema, analise as afirmativas a seguir.
I. Iniciadores degenerados são misturas de
oligonucleotídeos apresentando diferenças nos
nucleotídeos em várias posições.
II. A inosina é uma base que pareia somente com adenina e
timina.
III. Não é possível sintetizar iniciadores degenerados e que,
ao mesmo tempo, contenham inosina.
Assinale:
Sobre a utilização da técnica de PCR com a finalidade de
diagnóstico molecular, analise as afirmativas a seguir.
I. Uma vez que na reação de PCR se utiliza uma DNA
Polimerase dependente de DNA, somente os vírus cujo
genoma é constituído por DNA podem ser detectados
pela técnica de PCR.
II. É possível detectar microorganismos diferentes em uma
mesma reação de PCR, desde que se utilize na reação
pares de iniciadores específicos para cada
microorganismo que se queira detectar.
III. A utilização da técnica de PCR para diagnóstico
molecular terá sempre e somente caráter qualitativo.
Assinale:
Sobre a técnica de PCR em Tempo Real, assinale a afirmativa incorreta.
Analise as afirmativas abaixo.
I. Para o preparo de meio de cultivo de células eucarióticas,
deve-se inicialmente solubilizar os componentes do meio
com 80 a 90% do volume final de água destilada e
posteriormente adicionar os componentes como
bicarbonato e HEPES.
II. Após a esterilização do meio de cultura, deve-se ajustar o
pH do mesmo.
III. O soro de origem animal a ser utilizado no meio de cultivo
nunca deve ser sido inativado antes de ser adicionado ao
meio.
Assinale:
Para preparar um tampão Tris-HCl (PM = 157,6g) na concentração de 500mM, pH7,2, deve-se:
5' ATG GGG AAC AAG CCC GAG TCG -------------------------- CAC CAC TGG ATA AAA CCG AGA 3'
3' TAC CCC TTG TTC GGG CTC AGC --------------------------- GTG GTG ACC TAT TTT GGC TCT 5'
Para amplificação do fragmento de DNA representado acima, o par de iniciadores correto (senso e anti-senso, respectivamente),
está em:
Sobre os aspectos éticos da utilização de animais para
pesquisa, analise as afirmativas a seguir.
I. A criação ou a utilização de animais para pesquisa ficam
restritas, exclusivamente, às instituições credenciadas no
CONCEA.
II. O animal poderá ser submetido à qualquer intervenção,
mesmo que não descrita nos protocolos de pesquisa,
desde que antes, durante e após o experimento, receba
cuidados especiais, conforme estabelecido pelo
CONCEA.
III. O CONCEA, mesmo levando em conta a relação entre o
nível de sofrimento para o animal e os resultados práticos
que se esperam obter, não poderá restringir ou proibir
experimentos que importem em elevado grau de
agressão ao animal, desde que estes estejam justificados
no protocolo de pesquisa.
Assinale: